鼠角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)對巨噬細胞TLR2、TLR4、Dectin-1表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
　　通過檢測鼠角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)上清液處理過的巨噬細胞的TLR2、TLR4、Dectin-1 mRNA表達水平，明確角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)體系對巨噬細胞模式識別受體表達的影響。
　　方法:
　　取0～3天的C57BL/6J胎鼠，分離角質(zhì)形成細胞培養(yǎng)至第2代，制備鼠角質(zhì)形成細胞培養(yǎng)基b液（KC-72h液），鼠角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)基c液（KC-CA-72h液）。白色念珠臨床菌株在98℃

2、溫度下加熱10分鐘滅活。取9-12周齡C57BL/6J小鼠股骨、脛骨骨髓細胞分化誘導為成熟M1型巨噬細胞用于本實驗。將實驗分為:空白對照組、20％b液組、20％c液組，根據(jù)分組不同，用不同上清液分別預處理巨噬細胞12小時，收獲巨噬細胞，提取RNA，采用real-timePCR在mRNA水平檢測Dectin-1、TLR2、TLR4的表達水平。
　　結果:
　　經(jīng)鼠角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)上清液處理后，巨噬細胞表達Dect

3、in1 mRNA的水平與空白對照組相比減少（P＜0.05）;鼠角質(zhì)形成細胞上清液能夠促進巨噬細胞TLR4 mRNA表達，與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);經(jīng)鼠角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)上清液處理后，巨噬細胞表達TLR2、TLR4 mRNA的水平與空白對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;鼠角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)上清液處理后與僅經(jīng)鼠角質(zhì)形成細胞上清液處理后的巨噬細胞表達的TLR2、TLR4、Dectin

4、1 mRNA水平，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;僅經(jīng)鼠角質(zhì)形成細胞上清液處理后巨噬細胞表達TLR2、Dectin1 mRNA的水平與空白對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　結論:
　　鼠角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)能夠抑制巨噬細胞Dectin-1 mRNA的表達;僅經(jīng)角質(zhì)形成細胞上清液處理過的巨噬細胞，TLR4mRNA表達上升;鼠角質(zhì)形成細胞與白色念珠菌共培養(yǎng)對巨噬細胞TLR2、TLR4 mRNA的表達

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