彩色多普勒超無(wú)所忌憚對(duì)兔腎缺血再灌注后腎動(dòng)脈血流動(dòng)力學(xué)變化的評(píng)價(jià)及其與腎小管上皮細(xì)胞Bcl-2表達(dá)關(guān)系的研究.pdf

1、目的:運(yùn)用彩色多普勒超聲檢測(cè)兔腎缺血再灌注損傷后腎動(dòng)脈血流動(dòng)力學(xué)變化,分析其與腎小管上皮Bcl-2表達(dá)的相關(guān)性,探討彩色多普勒超聲評(píng)價(jià)腎缺血再灌注損傷程度的價(jià)值。
　　 方法:建立兔腎缺血再灌注模型,56只體重1.8—2.4kg的日本大白兔隨機(jī)分為三組:正常對(duì)照組(control組)8只,缺血再灌注組(I／R組)24只,假手術(shù)組(S組)24只。缺血再灌注組在麻醉后,開(kāi)腹,切除右腎,夾閉左腎動(dòng)脈1h后恢復(fù)血供,根據(jù)再灌注時(shí)間點(diǎn)不同

2、分為2h、8h、24h亞組.假手術(shù)組僅麻醉、開(kāi)腹、分離腎動(dòng)脈,不阻斷血流；根據(jù)根據(jù)保留左腎時(shí)間分為2h、8h、24h三個(gè)亞組。各組動(dòng)物按預(yù)定時(shí)間點(diǎn)探測(cè)腎動(dòng)脈的血流動(dòng)力學(xué)變化(Vmax、Vd、Tamax、PI、RI),取腎組織后處死兔子。用石蠟包埋切片,HE染色分析腎組織病理?yè)p傷程度,采用免疫組化(SABC)法檢測(cè)腎小管中Bcl-2蛋白的表達(dá)水平。運(yùn)用Image Plus Pro6.0圖像分析軟件進(jìn)行分析,計(jì)算陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞的平均光密度值。

3、
　　 結(jié)果:1.缺血再灌注后腎動(dòng)脈血流動(dòng)力學(xué)變化:與正常對(duì)照組、假手術(shù)各亞組分別比較,再灌注2h亞組腎主動(dòng)脈、段動(dòng)脈、葉間動(dòng)脈的Vmax、Vd、Tamax、PI、RI變化均無(wú)明顯差異(P>0.05)；與正常對(duì)照組、假手術(shù)各亞組分別比較,再灌注8h亞組腎主動(dòng)脈Vmax、Vd、Tamax、PI、RI變化均無(wú)明顯差異(P>0.05),段動(dòng)脈、葉間動(dòng)脈均出現(xiàn)RI增大(P<0.05)；與正常對(duì)照組、假手術(shù)各亞組分別比較,再灌注24h亞組

4、腎主動(dòng)脈、段動(dòng)脈、葉間動(dòng)脈均出現(xiàn)Vmax升高、PI及RI增大(P<0.05),而Vd及Tamax變化無(wú)明顯差異(P>0.05)。2.腎組織的病理變化:假手術(shù)組腎小管均未見(jiàn)明顯病變。缺血再灌注后2h、8h、24h時(shí)腎小管出現(xiàn)不同程度的上皮細(xì)胞腫脹、管腔擴(kuò)張,部分細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)空泡形成,24時(shí)腎小管損傷最重,可見(jiàn)大量壞死脫落細(xì)胞,間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。3.腎組織Bcl-2的表達(dá):假手術(shù)組腎小管上皮Bcl-2呈弱陽(yáng)性表達(dá),隨著保留左腎的時(shí)間延長(zhǎng),分為

5、2h、8h、24h三個(gè)時(shí)間點(diǎn),平均光密度值分別為0.2487±0.0232、0.2516±0.0347、0.2613±0.0414,各時(shí)間點(diǎn)之間Bcl-2表達(dá)的平均光密度值無(wú)明顯差異；缺血再灌注后Bcl-2的表達(dá)上升,主要表達(dá)于外髓及遠(yuǎn)曲小管,明顯較近曲小管強(qiáng),隨著缺血再灌注時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)范圍增加。缺血再灌注組分為2h、8h、24h三個(gè)時(shí)間點(diǎn),Bcl-2表達(dá)平均光密度值分別為0.2757±0.0321、0.2833±0.0214、0.33

6、12±0.0523均高于假手術(shù)組的各對(duì)應(yīng)組,并隨著缺血再灌注時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸上升,再灌注24h時(shí)達(dá)高峰,說(shuō)明Bcl-2蛋白隨著缺血再灌注損傷的加重表達(dá)增加。4.腎主動(dòng)脈、段動(dòng)脈、葉間動(dòng)脈的Vmax、PI、RI與Bcl—2的表達(dá)有直線正相關(guān)性,其中以各級(jí)動(dòng)脈的RI值和葉間動(dòng)脈的指標(biāo)相關(guān)性最高。
　　 結(jié)論:在兔腎缺血再灌注實(shí)驗(yàn)中,彩色多普勒超聲能實(shí)時(shí)定量監(jiān)測(cè)兔缺血再灌注損傷后24小時(shí)內(nèi)的腎動(dòng)脈血流動(dòng)力學(xué)變化；缺血再灌注后Bcl-2的