透明質(zhì)酸鈉對顳下頜骨關(guān)節(jié)病髁突軟骨修復(fù)作用的動物實驗研究.pdf

1、目的:
　　透明質(zhì)酸鈉行關(guān)節(jié)腔注射的彈性補充療法是臨床上常見的微創(chuàng)治療的手段，本實驗以狗為研究對象，通過一次性行關(guān)節(jié)腔注射膠原酶成功構(gòu)建狗的顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病的模型，然后行透明質(zhì)酸鈉關(guān)節(jié)腔注射治療，觀察髁突軟骨的組織病理學(xué)變化，進一步探討透明質(zhì)酸鈉對顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病的治療作用，為臨床研究工作提供依據(jù)。
　　方法:
　　將6只成年期雜種狗，體重為15-18kg，無明顯口頜系統(tǒng)疾病，速眠新Ⅱ號(軍需大學(xué)獸醫(yī)研究所)麻醉起

2、效后，在每只狗的左側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)上強一次性注射1％膠原酶1ml(400U/mg)。于注射后1、2、3、4、5、6周分別處死并完整取出髁突及關(guān)節(jié)盤、放入10％中性福爾馬林溶液中固定24小時。標(biāo)本放置于10％EDTA中性福爾馬林液中脫鈣2周(每2天更換一次脫鈣液)，至大頭針可以輕易刺透組織為止表明已經(jīng)基本脫鈣完畢。包埋后制作組織切片，進行HE染色和番紅O染色，觀察髁突軟骨的組織學(xué)變化，從而構(gòu)建TMJOA模型；另選6只相同規(guī)格雜種狗，在構(gòu)建雙側(cè)

3、TMJOA模型后，于1、2、3周，麻醉狀態(tài)下于左側(cè)TMJ上腔注射醫(yī)用透明質(zhì)酸鈉0.5ml(10mg/ml，分子量：84000)，右側(cè)注射生理鹽水0.5ml作對照，適應(yīng)性飼養(yǎng)4周后，處死并雙側(cè)TMJ取材、固定、脫鈣、包埋制作組織切片，進行HE和番紅O染色，對比觀察雙側(cè)髁突軟骨組織學(xué)變化，并按改良Mankin骨關(guān)節(jié)病組織學(xué)評價系統(tǒng)記分，采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析。
　　結(jié)果:
　　動物模型組的6只狗在注射膠原酶后

4、1、2、3、4、5、6周依次出現(xiàn)了表層膠原纖維的水解，蛋白多糖的丟失，軟骨表層粗糙不齊，并逐漸出現(xiàn)了關(guān)節(jié)軟骨的剝脫、崩解外，形成軟骨裂隙，部分區(qū)域骨質(zhì)暴露，紋理粗糙，出現(xiàn)骨質(zhì)增生，形成骨贅，成功建立了顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病的動物模型。
　　治療組的6只狗在建立雙側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病后，經(jīng)3周的透明質(zhì)酸鈉治療后，發(fā)現(xiàn)注射透明質(zhì)酸鈉側(cè)關(guān)節(jié)病變較對側(cè)輕，軟骨層次較為清晰，病變多數(shù)局限于表層；生理鹽水側(cè)關(guān)節(jié)病變較重，軟骨表面不規(guī)整，纖維軟骨層

5、次紊亂不清，纖維軟骨連續(xù)性中斷，部分區(qū)域纖維軟骨變性脫落已被排列雜亂的纖維組織取代；部分標(biāo)本出現(xiàn)骨裂、骨贅。透明質(zhì)酸鈉側(cè)評分為：3.17±0.75為(n=6)，生理鹽水側(cè)評分為：7.83±1.67(n=6)，用獨立樣本資料t檢驗，顯示兩側(cè)關(guān)節(jié)病變差異有顯著性(P<0.01)。番紅0染色對比顯示，透明質(zhì)酸鈉側(cè)關(guān)節(jié)軟骨染色較為均勻，顏色較深；生理鹽水側(cè)關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)中出現(xiàn)未染色區(qū)域。
　　結(jié)論:
　　1、通過一次性關(guān)節(jié)腔注射膠原酶

6、，可成功建立狗的TMJOA模型，病變從表層膠原纖維水解形成裂隙，軟骨表層粗糙不齊逐漸發(fā)展到關(guān)節(jié)軟骨的剝脫、崩解外，部分區(qū)域骨質(zhì)暴露，紋理粗糙，出現(xiàn)骨質(zhì)增生，形成骨贅。整個病變過程伴有軟骨基質(zhì)中蛋白多糖的逐漸丟失。本建模方法相對于手術(shù)方法操作簡單，病變典型，可重復(fù)性一致性較好，可很好的復(fù)制骨關(guān)節(jié)病的整個病變發(fā)展過程，是較為理想的建模方法。
　　2、外源性透明質(zhì)酸鈉行關(guān)節(jié)腔注射治療可以促進狗的TMJOA髁突軟骨的修復(fù)，其具體機制可能為