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文檔簡介
1、目的: 通過觀察冷敏感受體TRPM8在遠位觸液神經(jīng)元上存在表達,進一步探究遠位觸液神經(jīng)元的功能和性質(zhì)。
方法: 側(cè)腦室注射霍亂毒素亞單位B與辣根過氧化物酶復合物(CB-HRP)追蹤定位遠位觸液神經(jīng)元,用四甲基聯(lián)苯胺-鎢酸鈉(TMB-ST)的呈色反應及二甲基聯(lián)苯胺-氯化鈷(DAB-Co)穩(wěn)定(TMB-ST-DAB-Co法)驗證遠位觸液神經(jīng)元的分布;并將CB-HRP/TRPM8免疫熒光雙標與激光共聚焦顯微鏡技術(shù)相結(jié)合,觀察TR
2、PM8在遠位觸液神經(jīng)元上的表達情況。Image-Pro Plus圖像計數(shù)軟件用于計算CB-HRP陽性、TRPM8陽性和CB-HRP/TRPM8雙標陽性神經(jīng)元細胞的數(shù)目。
結(jié)果: 遠位觸液神經(jīng)元主要存在于中腦導水管腹側(cè)中線腦實質(zhì)內(nèi)和橋腦上段第三、四腦室的灰質(zhì)內(nèi)。CB-HRP/TRPM8雙標神經(jīng)元占TRPM8陽性神經(jīng)元百分比為42.93±2.29%;CB-HRP/TRPM8雙標神經(jīng)元與CB-HRP陽性神經(jīng)元分布相同。
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