版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:觀察正常大鼠觸液核內(nèi)TRPA1的分布及其在神經(jīng)病理疼痛過程中的表達(dá)變化,探討觸液核的功能及神經(jīng)病理性疼痛形成的可能機(jī)制。
方法:一、雄性SD大鼠(250±50g)6只,大鼠處死前48h側(cè)腦室引入CB-HRP追蹤定位觸液神經(jīng)元,應(yīng)用免疫熒光化學(xué)雙重標(biāo)記技術(shù)與激光共聚焦顯微鏡技術(shù)相結(jié)合,檢測TRPA1在正常大鼠觸液核的分布。
二、雄性SD大鼠(250±50g)隨機(jī)分為神經(jīng)病理性痛組(CCI組),假手術(shù)組(Sham組
2、)。
(1)行為學(xué)測定(n=8):應(yīng)用電子Von Frey觸痛儀和熱輻射刺激儀測定機(jī)械縮足閾值(MWT)和熱縮足潛伏期(TWL)作為行為學(xué)觀察指標(biāo)。以觀察疼痛隨時程的變化。
(2)觀察各神經(jīng)病理性疼痛各時間點(diǎn)TRPA1在觸液核中的表達(dá)變化:復(fù)制神經(jīng)病理性痛組及假手術(shù)組模型,每組又隨機(jī)分為第0天組,第1天組,第3天組,第5天組,第7天組,第10天組和第14天組七個亞組(n=6)。各組動物處死前48小時側(cè)腦室注射CB-H
3、RP以標(biāo)記觸液神經(jīng)元,取觸液核所在段腦組織,冰凍切片,做CB-HRP/TRPA1免疫熒光雙標(biāo)反應(yīng)。用激光共聚焦顯微鏡技術(shù)觀測比較TRPA1隨神經(jīng)病理性疼痛時程變化在大鼠觸液核中的表達(dá)變化。
結(jié)果:一、免疫熒光圖片顯示觸液核主要存在于中腦導(dǎo)水管腹側(cè)中線腦實(shí)質(zhì)內(nèi)和橋腦上段第四腦室的灰質(zhì)內(nèi)。正常條件下,觸液核內(nèi)見有CB-HRP/TRPA1受體陽性雙重標(biāo)記細(xì)胞,計數(shù)為249±19。
二、行為學(xué)表現(xiàn)
Sham組術(shù)前與
4、術(shù)后TWL與MWT數(shù)值均無顯著性差異(P>0.05)。CCI組第0天,第1天,第3天,第5天,第7天,第10天和第14天的TWL與MWT值分別為(15.64±1.62,55.95±6.82)、(15.17±3.03,54.71±5.46)、(12.46±2.27,42.29±5.84)、(10.40±2.55,33.89±4.66)、(6.13±1.33,19.38±3.81)、(9.67±1.42,30.40±4.34)、(12.09
5、±2.47,38.93±5.46)。CCI組第0天、第1天與Sham組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),CCI組第3、5、7、10、14天MWT與TWL值與Sham組比較降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。CCI組第1天MWT與TWL值與第0天比較無明顯差異(P>0.05),第3、5、7、10、14天MWT與TWL值與第0天比較,低于第0天(P<0.01),且自第3天開始降低,至第7天降至最低。
三、免疫熒光
6、 各組大鼠免疫熒光圖片均顯示TRPA1(綠色)、CB-HRP(紅色)和CB-HRP/TRPA1(黃色)免疫陽性細(xì)胞。CCI組與Sham組CB-HRP標(biāo)記陽性神經(jīng)元,組間無明顯差異(P>0.05)。Sham組術(shù)前與術(shù)后CB-HRP/TRPA1雙標(biāo)神經(jīng)元數(shù)目無明顯差異(P>0.05)。CCI第0天,第1天,第3天,第5天,第7天,第10天和第14天的CB-HRP/TRPA1雙標(biāo)神經(jīng)元數(shù)目分別為(241±11)、(246±12)、(385±
7、16)、(501±20)、(596±29)、(493±17)和(383±18)。CCI組第0天、第1天CB-HRP/TRPA1雙標(biāo)神經(jīng)元數(shù)與Sham組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),CCI組第3、5、7、10和14天五個時間點(diǎn)CB-HRP/TRPA1雙標(biāo)神經(jīng)元數(shù)與Sham組比較及與差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。CCI組第1天大鼠CB-HRP/TRPA1雙標(biāo)陽性細(xì)胞計數(shù)與0天比較無差異性(P>0.05),第3、5、7、10、1
8、4天與0天比較增多(P<0.01),自第3天開始增多,至第7天所有CB-HRP陽性細(xì)胞均與TRPA1共表達(dá),至第10天CB-HRP/TRPA1雙標(biāo)陽性細(xì)胞數(shù)有所下降。
結(jié)論:一、正常大鼠觸液神經(jīng)核團(tuán)內(nèi)存在TRPA1。
二、確定神經(jīng)病理性疼痛模型建立成功;大鼠腦實(shí)質(zhì)的特定部位恒定存在觸液核團(tuán);神經(jīng)病理性疼痛條件下,觸液核TRPA1表達(dá)增多,并與神經(jīng)病理性痛行為時相一致,提示觸液核可能是通過TRPA1受體在對神經(jīng)病理性疼
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 大鼠觸液核TRPV1的分布及其在神經(jīng)病理性痛條件下的表達(dá).pdf
- 大鼠觸液核和腦脊液ENK的分布及其在神經(jīng)病理性疼痛條件下的表達(dá).pdf
- 大鼠觸液核MrgA的表達(dá)及其在神經(jīng)病理性疼痛條件下的變化.pdf
- TRPA1在加巴噴丁治療神經(jīng)病理性疼痛中的作用.pdf
- 大鼠觸液核P2X3受體的表達(dá)及其在骨癌痛條件下的變化.pdf
- 大鼠觸液核酸敏感離子通道3的分布及其在炎性痛條件下的表達(dá).pdf
- 大鼠觸液核中TRPC6的分布及其在嗎啡依賴與戒斷條件下的表達(dá).pdf
- 毀損觸液核對神經(jīng)病理性疼痛大鼠行為學(xué)的影響.pdf
- P2X4Rs在大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)與觸液核的分布及其在神經(jīng)病理性疼痛中的作用.pdf
- 觸液核CaMK-IIα的分布及其在傷害性刺激條件下的表達(dá)變化研究.pdf
- 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白在大鼠神經(jīng)病理性痛發(fā)生機(jī)制中的作用.pdf
- JNK通路在姜黃素抗大鼠神經(jīng)病理性痛中的作用.pdf
- ERK通路在姜黃素抗大鼠神經(jīng)病理性痛中的作用.pdf
- 大鼠接觸腦脊液神核基質(zhì)金屬蛋白酶的分布及其在神經(jīng)病理性疼痛中的表達(dá).pdf
- PARP在大鼠腰5脊神經(jīng)結(jié)扎所致神經(jīng)病理性痛中的作用.pdf
- 坐骨神經(jīng)旁注射阿米替林對神經(jīng)病理性疼痛大鼠痛行為及其神經(jīng)病理學(xué)的影響.pdf
- 神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓APC-Cdh1的表達(dá)變化.pdf
- siRNA抑制DREAM基因表達(dá)治療神經(jīng)病理性痛的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 環(huán)氧合酶在神經(jīng)病理性痛中的作用及其機(jī)制研究.pdf
- 舒巴坦對CCI大鼠慢性神經(jīng)病理性痛和痛過敏的影響.pdf
評論
0/150
提交評論