APE1在擬老化大鼠模型蝸神經核中的表達研究.pdf

1、目的：初步探討轉錄因子脫嘌呤/脫嘧啶核酸內切酶1（apurinic/apyrimidinic Endonuclease1）APE1和NF-E2相關因子2（nuclear factor erythroid2）Nrf-2在D-半乳糖誘導的擬老化大鼠模型蝸核中的表達功能。
　　方法：選取2月齡聽功能正常的雄性健康Sprague-Dawley（SD）大鼠162只，隨機分為兩組，D-半乳糖擬老化組和對照組。D-半乳糖擬老化組：每日頸背部皮下

2、注射D-半乳糖（500mg/Kg）一次，連續(xù)8周；NS對照組：每日頸背部皮下注射0.9％生理鹽水（10ml/Kg）一次，連續(xù)8周。造模完成后，擬老化組和對照組再分為三個亞組：4月齡組（造模結束后0個月）、10月齡組（造模結束后6個月）6個月、16月齡組（造模結束后12個月），動物處死前聽性腦干反應（ABR）檢測大鼠聽閾，處死時留取各組大鼠的蝸神經核組織。TUNEL染色檢測蝸核細胞凋亡水平；尼氏染色檢測蝸核神經元密度；通過Western

3、blot和免疫組化染色檢測APE、Nrf-2在蝸核中的蛋白表達含量。
　　結果：①ABR聽性腦干測聽的聽力結果顯示：相同月齡、相同頻率（4kHz、8kHz、16kHz、24kHz、32kHz）擬老化組和對照組比較，閾值差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。②TUNEL染色結果顯示：4月齡時，擬老化組和對照組凋亡水平無明顯差異；10月齡和16月齡時，擬老化組和對照組相比，凋亡增加（p<0.05）。③尼氏染色結果顯示：4月齡和10月齡時，

4、擬老化組蝸核神經元細胞的密度與對照組相比無顯著變化，而16月齡時，擬老化組神經元密度降低（p<0.05）。④Western blot結果顯示：各時間點Nrf-2蛋白在擬老化組的表達較對照組顯著降低（p<0.01）；4月齡時APE1蛋白在擬老化組和對照組的表達差別沒有統(tǒng)計學意義，10月齡和16月齡時APE1蛋白在擬老化組的表達較實驗組下降（p<0.01）。⑤免疫組化結果顯示：Nrf-2蛋白在各時間點擬老化組的表達均較對照組降低；APE1蛋