大鼠觸液核MrgA的表達(dá)及其在神經(jīng)病理性疼痛條件下的變化.pdf

1、目的：觀察正常大鼠觸液核MrgA的表達(dá)及其在神經(jīng)病理性疼痛條件下不同時(shí)程的表達(dá)變化，進(jìn)一步探究觸液核在神經(jīng)病理性疼痛中的作用。
　　方法：實(shí)驗(yàn)用雄性SD大鼠，隨機(jī)分為三組：正常組、神經(jīng)病理性疼痛組(CCl組)和假手術(shù)組(Sham組)。CCI組按照經(jīng)典方法結(jié)扎坐骨神經(jīng)建立CCI模型，Sham組僅暴露坐骨神經(jīng)。選擇機(jī)械縮足閾值(MWT)和熱縮足潛伏期(TWL)作為行為學(xué)觀察指標(biāo)，觀察CCI組和Sham組0、1、3、5、7、10和14天

2、的行為學(xué)變化。CCI組和Sham組0、3、7和14天的大鼠處死前48小時(shí)側(cè)腦室引入可靠的CB-HRP追蹤定位觸液核。取觸液核所在段腦組織，冰凍切片，做MrgA/CB-HRP免疫熒光雙標(biāo)反應(yīng)。用激光共聚焦顯微鏡技術(shù)觀測比較這四個(gè)不同時(shí)程大鼠觸液核MrgA的表達(dá)變化。Image-Pro Plus圖像計(jì)數(shù)軟件用于計(jì)算CB-HRP陽性和CB-HRP/MrgA雙標(biāo)陽性神經(jīng)元細(xì)胞的數(shù)目。
　　結(jié)果：1.行為學(xué)結(jié)果：Sham組術(shù)前與術(shù)后MWI與

3、TWL數(shù)值均無顯著性差異(P>0.05)。CCI組MWI和TWL自3天起開始降低，7天達(dá)最低值，14天有所升高。第3、7和14天的MWT和TWL分別為(47.47±8.09，13.53±2.75)、(29.42±4.63，10.03±1.55)、(43.75±4.95，13.62±3.40)，與Sham組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2.正常大鼠觸液核有MrgA表達(dá)，MrgA/CB-HRP雙標(biāo)神經(jīng)元的數(shù)目為205.

4、83±15.03個(gè)，占CB-HRP標(biāo)記陽性神經(jīng)元的36.73±2.58％。
　　3.四個(gè)不同時(shí)程大鼠觸液核MrgA的表達(dá)變化：Sham組術(shù)前與術(shù)后雙標(biāo)神經(jīng)元數(shù)目和占CB-HRP標(biāo)記陽性神經(jīng)元的百分比均無顯著性差異(P>0.05)。各組CB-HRP標(biāo)記陽性神經(jīng)元，組間沒有顯著性差異(P>0.05)。CCI組大鼠觸液核MrgA的表達(dá)自3天起開始升高，7天達(dá)最高值，14天有所降低。與行為學(xué)結(jié)果相一致。CCI組第3天、第7天和第14天的M

5、rgA/CB-HRP雙標(biāo)神經(jīng)元數(shù)目和占CB-HRP標(biāo)記陽性神經(jīng)元的百分比分別為(301.33±16.82，52.70±2.10％)、(572.83±25.47，98.13±0.50％)和(399.83±14.54，69.70±4.56％)，與Sham組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　結(jié)論：1.正常大鼠觸液核表達(dá)MrgA；
　　2.神經(jīng)病理性疼痛條件下，觸液核MrgA表達(dá)增多，并與痛行為時(shí)相一致，提示觸液核神經(jīng)元