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文檔簡介
1、目的:觀察大鼠心交感神經(jīng)密度隨年齡增長的變化與去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運蛋白(norepinephrine transporter,NET)表達(dá)間的關(guān)系,并討論其意義。
方法:將不同年齡的雄性SD大鼠分為三組:即3(n=5)、10(n=5)、16月齡組(n=5)。各組分別進(jìn)行(1)超聲心動圖:分別測定左室室壁厚度、收縮末期直徑(LVDd)、左室舒張末期直徑(LVDs)、左室短軸縮短率(FS)、左室射血分?jǐn)?shù)(INEF)等指標(biāo),以評價左
2、室收縮功能;(2)有創(chuàng)血流動力學(xué)檢測:血流動力學(xué)指標(biāo):平均動脈壓(MBP)、左心室收縮壓(INSP)、左心室舒張末壓(LVEDP)、左心室內(nèi)壓上升及下降最大速率(LV±dp/dtmax),計算左、右心室重量指數(shù)(LVMI,RVMI);(3)觀察心臟膠原變化:用苦味酸-天狼猩紅染色測定各組大鼠左心室膠原容積分?jǐn)?shù)(collagen volume fraction,CVF),在偏振光顯微鏡下觀察染色結(jié)果并攝片,采用IPP軟件分析其結(jié)果。(4)
3、用免疫組織化學(xué)方法檢測酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase,TH)及NET表達(dá):常規(guī)石蠟包埋切片,免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測TH與NET表達(dá),并于顯微鏡下觀察左心室心肌組織中TH及NET變化并攝片,采用image pro plus6.0分析并以點計數(shù)的方法計數(shù)樣本組織中免疫染色陽性點總數(shù)。
結(jié)果:比較3、10、16月齡三組大鼠檢測結(jié)果,(1)超聲心動圖:隨年齡增大,心室壁增厚,射血分?jǐn)?shù)與短軸縮短率均無明顯改變(
4、P>0.05);(2)血流動力學(xué)指標(biāo):與3月組相比,10月組與16月組LV-dp/dtmax絕對值顯著降低(P<0.05),10月組與16月組間比較LV-dp/dtmax無顯著差異(P>0.05)。MBP、LVSP、LVEDP、LV+dp/dtmax各年齡組間均無顯著差異(P>0.05)。(3)心臟結(jié)構(gòu)變化:隨年齡增長心臟增大、左心室腔擴(kuò)大;光鏡下心肌纖維增粗,排列較規(guī)則;各年齡組間LVMI、RVMI無明顯差異(P>0.05)。(4)苦
5、味酸-天狼猩紅染色測定膠原容積分?jǐn)?shù):3月組與10月組大鼠心肌膠原容積分?jǐn)?shù)明顯低于16月組(P<0.05),16月組大鼠左室心肌CVF比3月組增長了約67%,但3月組與10月組間無明顯差異(P>0.05)。(5)TH及NET免疫組織化學(xué)染色:TH染色,與3月組相比,10月組和16月組TH陽性點計數(shù)均明顯降低,16月齡組TH陽性點計數(shù)比3月齡組降低51.2%,且各組間皆有差異(P<0.05)。NET染色,與3月組相比,10、16月組NET陽
6、性點計數(shù)均明顯降低(P<0.05);16月組NET陽性點計數(shù)與10月組相比,亦顯著降低(P<0.05),且16月齡組NET陽性點計數(shù)比3月齡組降低25.4%。
結(jié)論:老齡化過程中,(1)大鼠左室心肌交感神經(jīng)密度與NET表達(dá)水平下降,NET表達(dá)水平的下降與交感神經(jīng)密度的降低可能有一定關(guān)系。(2)NET活性的降低很可能與NET表達(dá)水平降低有關(guān)。(3)NET活性下降可致心肌間質(zhì)中NE濃度增加,NE刺激可增加膠原含量,促使左室舒張
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