中國漢族人群免疫球蛋白受體同系物家簇基因單核苷酸多態(tài)性與強直性脊柱炎的關聯(lián)研究.pdf

1、強直性脊柱炎（Ankylosing Spondylitis，AS）是一種血清學陰性，主要侵犯中軸骶骼關節(jié)的慢性炎癥性自身免疫性疾病，其臨床發(fā)病率較高，多見于青壯年男性，且有較高的家族聚集性。該病目前病因尚不明確，其發(fā)病被認為與多種因素有關，是一種十分復雜的疾病，又稱為多因子疾?。╩ultifactorial disease）。雖然針對AS的病因和發(fā)病機制，已經(jīng)提出過很多學說，包括分子模擬學說、致關節(jié)炎多肽學說、HLA-B27 分子非折疊

2、蛋白理論假說等，但到目前為止，AS發(fā)生的確切原因尚不清楚。國內外大量研究表明，遺傳因素是強直性脊柱炎發(fā)病的主導因素，通過全基因組掃描發(fā)現(xiàn)，多個區(qū)域與AS易感性有關[1,2]。其中以HLA-B27為代表的HLA區(qū)基因與AS的關聯(lián)性最強，HLA-B27與AS的遺傳易感性研究已經(jīng)經(jīng)歷了30多年，在不同國家和地區(qū)都得到了證實，但確切的發(fā)病機理還不是十分清楚，而且整個HLA區(qū)域只能解釋AS遺傳易感性的40-50％，因此，非HLA區(qū)基因與AS易感性

3、關聯(lián)研究將是下一步研究的重點和熱點。
　　 本研究旨在通過較大規(guī)模的強直性脊柱炎的遺傳流行病學調查，借助人類基因組計劃的研究成果，明確中國漢族人群易感區(qū)域易感基因（免疫球蛋白受體同系物基因）的單核苷酸多態(tài)性及單倍型與AS的遺傳關聯(lián)性，構建中國人群該易感家簇基因中與AS有關聯(lián)意義的單核苷酸多態(tài)性(Single nucleotide polymorphism,SNP)和單倍型,并初步探討基因和環(huán)境的交互作用。本研究采用經(jīng)典病例對照設

4、計方案，以問卷調查的方式，共收集169例HLA-B27陽性患者(107 男性和62女性)和184個HLA-B27陽性健康對照(112個男性和72個女性)的一般流行病學資料和DNA血樣，選擇免疫球蛋白受體同系物家族基因中的FCRL1（1個功能SNP）、FCRL3（3個功能SNP）、FCRL4(1個功能SNP)、以及FCRL5(4個功能SNP)四個基因中的9個功能SNP（即改變氨基酸序列的非同義突變），通過PCR擴增后，用連接酶檢測反應的方

5、法篩查這些功能SNP位點的基因型及其在中國人群中的頻率；并構建中國漢族人群中與AS有關聯(lián)的SNPs和單倍型。用EPIdata 3.0軟件建立數(shù)據(jù)庫，數(shù)據(jù)經(jīng)檢錯、整理后分別應用社會科學統(tǒng)計軟件包（SPSS10.01）和經(jīng)典的病例對照在線分析軟件Shesis（http://analysis.bio-x.cn/myAnalysis.php）進行統(tǒng)計學分析。應用非條件多元Logistic回歸方法分析AS可能存在的基因和環(huán)境交互作用。169個患者

6、來自安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院的門診和住院病人，平均年齡為26.38±6.32歲（其中最小為14歲，最大為78歲）。通過對FCRL中的五個基因中的9個SNP位點進行篩查，結果未發(fā)現(xiàn)FCRL1、FCRL3和FCRL4中的SNPs與AS有遺傳關聯(lián)性，而FCRL5基因中的2個SNPs（rs12036228和 rs6427384）與AS存在遺傳上的關聯(lián)性，進一步分析提示rs12036228位點上C等位基因的出現(xiàn)增加AS發(fā)病的風險性，而rs6427

7、384位點上T等位基因的出現(xiàn)增加AS發(fā)病的風險性,在對上述2個SNP位點進行單倍型分析后發(fā)現(xiàn)：攜帶有C-C單倍型的個體對AS發(fā)病具有保護性作用，而攜帶有C-T單倍型的個體則對AS的發(fā)病具有更高風險性。同時我們對中國漢族人群的HLA-B27及其亞型的結果進行篩查，研究結果提示在中國漢族人群中存在四種亞型(B * 2703,B * 2704，B * 2705和B * 2706)，其中病例組中以B*2704和B*2705兩個亞型較常見，分別占

8、53.8％和34.9％，對照組中同樣是B*2704和B*2705兩個亞型較常見，病例組這兩個亞型的比例高于對照組，但結果無統(tǒng)計學意義（c2=7.014,P=0.056）；另外對影響總體背痛程度因素進行單因素分析，沒有發(fā)現(xiàn)對總體背痛程度有統(tǒng)計學意義的因素，故沒有進一步進行多元分析。通對BASFI影響因素進行多因素分析結果提示性別、病程、學歷、飲酒史可能是BASFI影響因素；同時我們將可能與AS發(fā)病有關的環(huán)境因素和可能易感SNP位點及交互項

9、進行非條件logistic回歸的擬合分析，結果顯示：在調整其他自變量的情況下，最后進入模型的兩個變量是有感染史和家庭居住環(huán)境，但沒有發(fā)現(xiàn)FCRL5基因與上述環(huán)境因素之間存在交互作用。
　　 綜上所述，本研究認為在中國漢族人群中免疫球蛋白受體同系物家族基因（位于1q23-24區(qū)域）可能與強直性脊柱炎的遺傳易感性有關，特別是FCRL5基因；同時還受到環(huán)境因素的作用，但本次研究未發(fā)現(xiàn)基因和環(huán)境因素對AS存在交互作用。至于不同HLA-B