大黃素對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠腦基底動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞大電導(dǎo)鈣激活鉀通道的作用.pdf

1、目的：研究提純的大黃素（純度在98％以上）對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(Spontaneously Hypertensive Rat, SHR)腦基底動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(Basilar Arterty Smooth Muscles Cells, BASM Cs)大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(Large-conductance Ca2+-activated K+Channel, BKCa)的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：應(yīng)用無痛尾動(dòng)脈測壓技術(shù)觀察大黃素干預(yù)前后SH

2、R血壓的變化情況；應(yīng)用壓力小動(dòng)脈測量儀觀察大黃素干預(yù)前后SHR腦基底動(dòng)脈直徑的變化；應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察大黃素對(duì)SHR BASMCs BKCa介導(dǎo)的外向電流的調(diào)節(jié)作用；應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察大黃素干預(yù)前后SHR BASMCs BKCaβ1亞基的表達(dá)分布情況；應(yīng)用Western Blot技術(shù)研究給予大黃素干預(yù)前后SHR BASMCs BKCaβ1亞基表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：(1)給予大黃素干預(yù)后，高血壓大鼠的血壓由223±16

3、 mmHg降至127±12 mmHg，和Wistar大鼠和大黃素干預(yù)組血壓相比，均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；(2)將血管段置于含有PE(10-5μmol/L)水浴槽中孵育20分鐘，給予含有大黃素(10-5 mol/L)和PE(10-5μmol/L)的PSS液體，給藥前后血管直徑分別為：246.6±14.9μm和293.3±21.7μm(n=6，p<0.05)；(3)單個(gè)平滑肌細(xì)胞電壓鉗制在-40 mV，在20-60 mV下，大黃素(10-5 mol

4、/L)呈電壓依賴性增加平滑肌細(xì)胞外向電流(n=6，p<0.05)；依次給予10-7、10-6和10-5 mol/L大黃素，平滑肌細(xì)胞外向電流(+60 mV)隨大黃素濃度的增加而增加(n=6，p<0.05)；(4) TEA(10-3 mol/L)和 BKCa通道特異性阻斷劑 IBTX(10-7 mol/L)均能阻斷大黃素對(duì)BASMCs外向電流的增強(qiáng)作用(n=6，p<0.05)；(5)將SHR BASMCs置于無鈣離子的細(xì)胞外液中孵育30分

5、鐘；大黃素對(duì)BASMCs外向電流的增強(qiáng)作用消失(n=6，p<0.05)；(6)尼莫地平和BAPTA-AM均能抑制大黃素對(duì)SHR BASMCs外向電流的增強(qiáng)作用(n=6，p<0.01)；(7)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)：大黃素干預(yù)后BKCa通道β1亞基光密度分布增加(P<0.01，n=4/group)；(8)應(yīng)用Western Blot技術(shù)發(fā)現(xiàn)：Wistar大鼠組、SHR組和大黃素干預(yù)組BASMCs BKCa通道β1亞基表達(dá)量依次上調(diào)(n=