痤瘡乳膏的工藝制備及質量標準和體外透皮實驗研究.pdf

1、痤瘡乳膏劑的方藥是西苑醫(yī)院皮膚科姚主任在長期臨床治療痤瘡過程中的經驗方。多年臨床使用證明,此處方制成的痤瘡液外用對于痤瘡有著顯著的治療效果[1]。這為本處方乳膏劑的深入研究奠定了扎實的臨床基礎。痤瘡乳膏的處方組成為生大黃、白花蛇舌草、大青葉、茵陳、蒼術、丹參、生地榆、生甘草、冰片,共九味中藥,具有清熱解毒,活血除濕的功效。主治由飲食不節(jié),過食肥甘厚味,肺胃濕熱,復感風熱毒邪,上攻于面引起的痤瘡。
　　 本課題以傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論為指

2、導,運用現代的制藥技術和外用劑型,對其方藥進行劑型改革以及工藝篩選,質量標準及透皮實驗研究。根據處方的功效主治及藥物所含成分的理化性質,采用水煎煮的提取方法,選擇加水量(A),煎煮時間(B),煎煮次數(C)三個因素,每個因素選擇3個水平,按L9(34)正交表安排試驗。每份取大黃、白花蛇舌草等除冰片外的八味中藥共70g,進行煎煮。由于大黃中的大黃素、大黃酚為主要有效成分,故以測定的干浸膏粉得率和樣品中大黃酚、大黃素的含量為指標進行綜合評分

3、,將浸出干粉得率和樣品中大黃酚、大黃素的含量的權重系數分別定為0.5和0.5,用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析,結果表明影響綜合指標的提取因素依次為C>A>B,篩選出最佳提取工藝為:取處方除冰片外的八味中藥加12倍水煎煮,煎煮3次,每次1.5小時。合并煎煮的藥液,過濾,濃縮,加95％的乙醇使含醇量達65％。靜置24小時,取上清液,濾過,濾液回收乙醇至無醇味,80℃減壓干燥,得到干浸膏粉,備用。
　　 考慮臨床用藥需要,以及方中

4、各味中藥的性質,結合提取方法,故將處方制成的痤瘡液改革為軟膏劑中的乳膏劑,并選擇水包油型(O/W)基質。對油相、水相組成配比進行篩選,制備了四種處方基質,以外觀性狀,酸堿度,離心試驗,耐寒耐熱試驗,低溫與熱恒溫試驗為評價指標。綜合以上考察結果得出4號處方為最佳基質組成配比,即:1000g乳膏基質中油相:硬脂酸10g、凡士林100g、羊毛脂80g、十六醇80g、單硬脂酸甘油酯40g；水相:十二烷基硫酸鈉20g、甘油130g、月桂氮卓酮25

5、g、水513g、對羥基苯甲酸乙酯2g。
　　 痤瘡乳膏的制備工藝為:稱取硬質酸,凡士林,羊毛脂,硬脂酸甘油脂,十六醇,加入冰片,加熱至85℃,攪勻,作為油相,備用；另取甘油,對羥基苯甲酸乙酯,十二烷基硫酸鈉,月桂氮卓酮,加入干浸膏粉適量,用水調節(jié)使油、水兩相共1000g,作為水相,加熱至90℃,待全部溶解后,恒溫至85℃,攪勻；將油相緩緩加入水相,置勻漿機中攪拌(1000rpm,15min),冷卻,凝固,分裝,即得。
　　

6、 筆者對該制劑進行了質量標準研究,應用HPLC法測定痤瘡乳膏中的大黃素、大黃酚的含量。使用Agilent ZORBAX SB-C18柱,流動相為甲醇:0.1％磷酸混合溶液(85:15),檢測波長440nm。標準曲線為大黃素:Y=9.11×102X+0.466,r=0.9996；線性范圍0.024～0.3μg;大黃酚:Y=1.05×103X-0.164,r=0.9996；線性范圍0.02～0.25μg。
　　 還進行了方法學考察

7、,結果顯示樣品平均回收率為:大黃素99.5％,RSD=2.98％:大黃酚97.4％,RSD=2.33％。并對三批痤瘡乳膏進行含量測定,大黃素和大黃酚總量的平均值為72.51μg/g,故暫定痤瘡乳膏中大黃素和大黃酚的總量不得少于58μg/g。本方法準確而且重復性好,可用于痤瘡乳膏中大黃素、大黃酚的含量測定。同時對方中大黃,大青葉,白化蛇舌草進行了薄層色譜鑒別。
　　 在質量標準可控的基礎上對該制劑進行了透皮吸收的研究,本試驗以方中

8、君藥大黃中主要有效成分大黃素、大黃酚為測定指標,采用改良的Franz雙室滲透裝置,以離體小鼠皮膚為透皮屏障,進行體外滲透試驗。試驗條件為:有效透過面積3.80cm2,內徑為2.2cm,載藥量大于0.5g,磁力攪拌器速度為100r·min-1,恒溫(37±1)℃。接收液乙醇:生理鹽水=5:5(v:v)。在2,4,6,8,12,16,24h全部倒出接受液,同時迅速補充等體積接受液進行下一步試驗。
　　 試驗結果顯示大黃素和大黃酚在2

9、4小時內,藥物含量為20％的痤瘡乳膏平均累積透過量為每克痤瘡乳膏98.291μg。試驗表明,痤瘡乳膏經皮膚透過大黃酚和大黃素的量基本穩(wěn)定,且重現性較好。隨時間基本成相同的滲透速率透過。通過對其最佳透皮實驗條件和促滲劑的選擇,為研究痤瘡乳膏透皮給藥提供了參考依據,同時對中藥軟膏劑透皮實驗的標準化進行了初步探討。
　　 考慮到臨床使用的安全性,進行了皮膚刺激性試驗,分別采用單次涂藥的給藥方法觀察72小時,多次涂藥的給藥方法觀察一周。