急性排斥反應(yīng)時移植腎組織內(nèi)HLA-Ⅱ的表達研究.pdf

1、目的：隨著外科腎移植手術(shù)技術(shù)的發(fā)展和各種新型免疫抑制藥物的開發(fā)應(yīng)用，臨床腎移植已經(jīng)逐漸被人們接受，并得以廣泛開展，成為治療終末期腎病的有效方法。但同種異體移植術(shù)后發(fā)生的排斥反應(yīng)，特別是急性排斥反應(yīng)是制約當(dāng)前臨床。腎移植，乃至整個器官移植發(fā)展的主要因素之一。隨著人類在分子生物學(xué)領(lǐng)域研究的進展以及在基因技術(shù)方面的進一步突破，人們認識到MHC基因表達與免疫排斥反應(yīng)的關(guān)系密切，特別是對能引起急性排斥反應(yīng)的MIIC-II類分子的研究成為近20年來

2、的熱點。在誘發(fā)免疫排斥反應(yīng)的幾個環(huán)節(jié)中，T細胞活化是啟動同種排斥反應(yīng)的始動環(huán)節(jié)，T細胞表面的T細胞受體(T cell receptor，TCR)與移植物表面供體特異性主要組織相容性復(fù)合體(major histocomptibilitycompletment，MHC)分子及其提呈抗原之間相互作用所表達的第一信號和共刺激通路激活后所表達的第二信號的雙重參與是T細胞活化并最終導(dǎo)致特異性免疫反應(yīng)的必要條件。MHC分子表達于所有人類細胞表面，在特

3、定的條件下能引起強而迅速的排斥反應(yīng)，通常稱為人類白細胞抗原(Human．leukocvte antigen，HLA)。本研究擬探討MHC-Ⅱ類分子在臨床腎移植中的表達規(guī)律，了解其與急性排斥反應(yīng)的關(guān)系。 方法：本研究為一項對照試驗，自2004年9月至2005年12月期間，對于在中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院衛(wèi)生部器官移植研究院進行腎移植的53例患者，根據(jù)自愿原則行移植腎活檢。其中男性45例，女性8例。年齡13-62歲，平均43±5

4、歲。術(shù)后常規(guī)免疫抑制方案為環(huán)孢素A、曉悉和強的松，所有病人均隨訪滿6個月以上。腎活檢組織用10％中性福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片。用免疫組化技術(shù)檢測腎組織內(nèi)HLA-Ⅱ的表達?；顧z時間：術(shù)中(供腎修整結(jié)束時)、術(shù)后7天、1月、6月、1年或1年以上，當(dāng)患者出現(xiàn)腎功能異常隨時進行移植腎活檢。 結(jié)果：①腎活檢結(jié)果：53例腎移植受體共行腎活檢198次。其中供腎修整結(jié)束時取活檢53例次；術(shù)后。腎功能正常時(穩(wěn)定期)定期穿刺活檢81

5、例次；腎功能異常時腎活檢64例次，包括急性排斥反應(yīng)(acute rejection，AR)28例次，抗AR治療后9例次，非急性排斥反應(yīng)(N-AR)27例次(輸尿管并發(fā)癥6例、慢性排斥反應(yīng)14例、藥物性。腎損傷7例次)。②HLA-Ⅱ抗原表達：HLA-Ⅱ在所有活檢的腎組織上皮細胞上表達陽性，與移植前比較，腎功能穩(wěn)定期的標(biāo)本中，術(shù)后7天腎小管上皮細胞陽性率顯著增加，其后逐漸下降，半年后轉(zhuǎn)陰性；與移植前比較，AR時HLA-Ⅱ抗原在腎小管上皮細胞

6、、血管內(nèi)皮細胞、上皮細胞和炎性細胞上的表達均顯著增加，其中炎性細胞全部呈陽性表達，系膜細胞陽性率為25％，腎小管上皮細胞陽性率為75％，血管內(nèi)皮細胞陽性率為82％；抗排斥治療7天后HLA-Ⅱ抗原的表達下降至術(shù)前水平，其中系膜細胞無一例陽性，腎小管上皮細胞陽性率下降為11％，血管內(nèi)皮細胞陽性率為22％；移植后N-AR組系膜細胞染色陽性僅為3.7％，腎小管上皮陽性率為14.8％，血管內(nèi)皮細胞陽性率為44％，所以AR組在腎小管上皮細胞、血管內(nèi)

7、皮細胞和上皮細胞上HLA-Ⅱ的表達也具有顯著差異(p<0.05)。 結(jié)論：①移植腎組織內(nèi)HLA-Ⅱ類分子表達與排斥反應(yīng)密切相關(guān)，提示該分子在腎移植排斥反應(yīng)的病理損害過程中起重要作用。②AR時移植腎組織內(nèi)大量淋巴細胞浸潤，并且炎性細胞以及排斥反應(yīng)的靶細胞如腎小管上皮細胞、血管內(nèi)皮細胞上HLA-Ⅱ類分子強表達。③HLA-Ⅱ類分子表達是動態(tài)變化的。移植物表面HLA-Ⅱ類分子的表達變化可影響其免疫原性的反應(yīng)原性。④用免疫組織化學(xué)技術(shù)測定