能量限制通過調(diào)節(jié)IGF-1水平影響成年雌性大鼠生殖潛能.pdf

1、研究目的：
　　觀察能量限制（CaloricRestrictionCR）對成年雌性大鼠生殖軸及卵泡發(fā)育的影響，并對其可能的調(diào)控機制進行探討。
　　材料與方法：
　　取8周齡雌性SD大鼠39只，體重200±20g。適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后隨機分為：對照組；25％CR組和45%CR組共3組，單籠飼養(yǎng)，自由攝水。記錄對照組每日攝食量，并將此攝食量的75%和55%分別喂養(yǎng)25%CR和45%CR組大鼠。限食實驗開始后每日給予陰道涂片觀察

2、動情周期變化并記錄食物攝入量，每周監(jiān)測體重變化一次。在實驗開始后第1，4，7，10周分別取血一次監(jiān)測血清胰島素樣生長因子（IGF-1）及性激素（雌激素，黃體生成素，卵泡刺激素）和的變化。實驗第10周處死大鼠，取卵巢組織進行切片（每張切片之間至少間隔200μm），蘇木精-伊紅染色觀察各級卵泡并計數(shù)：從卵巢最大切面往兩邊依次選取7張組織切片用于HE染色，計數(shù)每張卵巢組織切片上各級卵泡數(shù)量，計算7張切片上卵泡總數(shù)和各級卵泡數(shù)量占卵泡總數(shù)的百分

3、比例。所有數(shù)據(jù)以X±SEM表示，組間比較用方差分析和卡方檢驗。免疫組化染色觀察胰島素樣生長因子-1在卵巢組織中的表達與定位。
　　結(jié)果：
　　1）在實驗過程中對照組大鼠體重持續(xù)明顯上升，25%CR組大鼠體重僅有小幅上升，45%CR組大鼠體重則出現(xiàn)了小幅下降。在實驗第2周時45%CR組體重與對照組比較已經(jīng)出現(xiàn)明顯差異（210.17±6.18gVS188.73±3.10g，p<0.05）。在實驗第3周時25%CR組體重與對照組比

4、較也有了顯著差異（230.00±7.38gVS205.42±3.38g，p<0.05）。
　　2）動情周期的監(jiān)測結(jié)果為：對照組大鼠整個實驗過程中都表現(xiàn)為規(guī)則的動情。25%CR組大鼠有25%動情周期不規(guī)則，主要表現(xiàn)在動情周期的延長，平均為7.8±0.6天，45%CR組有60%動情周期不規(guī)則，主要表現(xiàn)在動情周期的延長，也有個別大鼠表現(xiàn)為持續(xù)動情（最長持續(xù)動情23天）。
　　3）血清免疫學實驗提示IGF-1水平隨著能量攝入的減少而

5、不斷下降。45%CR組大鼠在實驗第7周時血清IGF-1水平(8.54±0.56μg/L)較第1周(12.26±0.57μg/L)已經(jīng)開始出現(xiàn)明顯的下降（p<0.05），而25%CR組大鼠至實驗第10周時才出現(xiàn)顯著差異(9.69±0.79μg/LVS12.23±0.82μg/L，P<0.05）。能量攝入的減少使雌激素水平下降，但是卵泡刺激素與黃體生成素并沒有因為雌激素的下降反射性的升高。雌激素，黃體生成素和卵泡刺激素均呈下降趨勢。

6、　　4）組織學分析提示了25%及45%組的大鼠卵巢相對于對照組有更多的原始卵泡（97.92±9.06；129.4±7.79VS39.33±3.28，P<0.05）和更多的存活卵泡（219.58±15.31；234.80±12.53VS154.83±8.05，P<0.05）。免疫組化提示IGF-1主要在存活的卵母細胞的胞漿中表達。
　　結(jié)論：
　　能量限制能夠通過降低IGF-1水平抑制下丘腦-垂體-卵巢這一生殖軸，抑制FSH，