鯽魚(yú)、草魚(yú)離體腸道對(duì)酪氨酸和脯氨酸的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)與利用的研究.pdf

1、飼糧中的蛋白質(zhì)在動(dòng)物腸道內(nèi)必須被降解為游離氨基酸或由2～3個(gè)殘基組成的小肽(smallpeptide，SP)才能被腸道所吸收，而腸粘膜對(duì)氨基酸及小肽的吸收對(duì)于蛋白質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)的整個(gè)代謝過(guò)程起著承上啟下的關(guān)鍵作用，因此有關(guān)腸道氨基酸吸收的研究一直是動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)家關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題。對(duì)小鼠、大鼠、兔、畜禽及人類的腸吸收機(jī)制已進(jìn)行了大量的研究，但有關(guān)魚(yú)類腸道吸收氨基酸機(jī)制的報(bào)道并不多見(jiàn)，尤其是魚(yú)類腸道粘膜利用吸收后的氨基酸合成蛋白質(zhì)、脂類等物質(zhì)的代

2、謝研究更是鮮見(jiàn)報(bào)道。 本文初步研究并比較了鯽魚(yú)和草魚(yú)腸道吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)酪氨酸與脯氨酸并利用吸收后的酪氨酸、脯氨酸合成蛋白質(zhì)、脂類的動(dòng)力學(xué)，而且在此基礎(chǔ)上，探討了鯽魚(yú)和草魚(yú)離體腸道對(duì)四種蛋白質(zhì)飼料酶解液中氨基酸的吸收及轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)力學(xué)，旨在為水產(chǎn)動(dòng)物的蛋白質(zhì)及氨基酸營(yíng)養(yǎng)研究提供一些基礎(chǔ)理論數(shù)據(jù)與一種簡(jiǎn)便有效的研究方法?，F(xiàn)將主要結(jié)果總結(jié)如下： 試驗(yàn)一：鯽魚(yú)、草魚(yú)離體腸道對(duì)酪氨酸和脯氨酸的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)與利用的研究。該試驗(yàn)采用同位素示蹤法和

3、腸道離體灌流模型分別測(cè)定了鯽魚(yú)、草魚(yú)離體腸道對(duì)酪氨酸和脯氨酸的吸收量、吸收速率、跨壁運(yùn)輸量隨相應(yīng)氨基酸灌流時(shí)間和濃度的變化而變化的關(guān)系以及腸粘膜中參與合成蛋白質(zhì)與脂類的氨基酸的量。試驗(yàn)結(jié)果表明： 1.氨基酸濃度對(duì)吸收速率有顯著影響：隨著灌流酪氨酸、脯氨酸濃度的增加，鯽魚(yú)、草魚(yú)腸道對(duì)其的吸收速率與其濃度均呈正相關(guān)關(guān)系。腸道內(nèi)灌流的酪氨酸濃度分別為2.5mmol.L-1、1.5mmol.L-1、0.5mmol.L-1時(shí)，鯽魚(yú)腸道在1

4、0分鐘時(shí)的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)速度相應(yīng)地分別為0.387umol.g-1腸.min-1、0.153umol.g-1腸.min-1和0.087umol.g-1腸.min-1；草魚(yú)分別為0.047umol.g-1腸.min-1、0.025umol.g-1腸.min-1和0.016umol.g-1腸.min-1，鯽魚(yú)的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)速度極顯著高于草魚(yú)(△S＞LSD0.01)；腸道內(nèi)灌流的脯氨酸濃度分別為10mmol.L-1、5mmol.L-1、1mmol.L-

5、1時(shí)，鯽魚(yú)腸道在10分鐘時(shí)的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)速度分別為0.876umol.g-1腸.min-1、0.426umol.g-1腸.min-1和0.078umol.g-1腸.min-1，草魚(yú)分別為0.302umol.g-1腸.min-1、0.255umol.g-1腸.min-1和0.019umol.g-1腸.min-1，鯽魚(yú)對(duì)脯氨酸的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)速度顯著高于草魚(yú)(△S＞LSD0.05)。 2.吸收率與氨基酸濃度關(guān)系：鯽魚(yú)腸道對(duì)酪氨酸、脯氨酸的總吸

6、收率大體上是隨著灌流氨基酸濃度的下降而呈下降趨勢(shì)，脯氨酸各濃度組的總吸收率之間差異顯著(△S＞LSR0.05)，而酪氨酸0.5mmol.L-1組(2.44％)高于1.5mmol.L-1濃度組(2.38％)，但三組之間差異并不顯著(△S＜LSR0.05)。草魚(yú)腸道對(duì)酪氨酸總的吸收率隨著灌流氨基酸濃度的下降而呈上升趨勢(shì)，0.5mmol.L-1組(3.05％)顯著高于其他兩組(△S＞LSR0.05)，對(duì)脯氨酸的總吸收率以5mmol.L-1組(

7、8.14％)最高，并極顯著高于其他兩組(△S＞LSR0.01)。 3氨基酸在腸壁內(nèi)外的分布與其氨基酸濃度的關(guān)系：腸道從灌流液吸收的氨基酸部分轉(zhuǎn)運(yùn)到腸壁外，部分留存于腸壁內(nèi)。當(dāng)腸道內(nèi)Tyr灌流的濃度從2.5mmol.L-1降低到1.5mmol.L-1、0.5mmol.L-1時(shí)鯽魚(yú)留存于腸壁的酪氨酸比例從46.89％、46.88％、降低到41.40％，而通過(guò)腸壁轉(zhuǎn)運(yùn)到腸壁外的比例則從53.11％、53.12％增加到58.60％；草魚(yú)

8、留存于腸壁的酪氨酸從77.44％、75.12％降低到56.18％，而通過(guò)腸壁轉(zhuǎn)運(yùn)到腸壁外的比例則從22.56％、24.88％、增加到43.82％；草魚(yú)留存于腸壁的比例極顯著高于鯽魚(yú)(△S＞LSD0.01)，且兩種魚(yú)各自在1.5mmol.L-1、2.5mmol.L-1時(shí)留存于腸壁的酪氨酸比例都差異不顯著(△S＜LSD0.05)。在腸道內(nèi)灌流的脯氨酸濃度從10.0mmol.L-1降低到5.0mmol.L-1、1.0mmol.L-1時(shí)鯽魚(yú)留存

9、于腸壁的脯氨酸比例從57.17％、41.30％降低到37.89％，而通過(guò)腸壁轉(zhuǎn)運(yùn)到腸壁外的比例則從42.83％、58.70％增加到62.11％、；而草魚(yú)留存于腸壁的脯氨酸比例從76.00％、75.69減少到72.31％，而通過(guò)腸壁轉(zhuǎn)運(yùn)到腸壁外的比例則從24.00％、24.31％增加到27.69％，草魚(yú)留存于腸壁的比例極顯著高于鯽魚(yú)(△S＞LSD0.01)，且草魚(yú)在10.0mmol.L-1、5.0mmol.L-1時(shí)留存于腸壁的脯氨酸比例差

10、異不顯著(△S＞LSD0.01)。 4.腸壁在吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)酪氨酸、脯氨酸的同時(shí)也在利用其用于蛋白質(zhì)、脂肪的合成。灌流氨基酸濃度的變化對(duì)鯽魚(yú)、草魚(yú)利用氨基酸的影響均較大，而且鯽魚(yú)、草魚(yú)利用酪氨酸、脯氨酸的方式和程度有顯著差異： 留存于腸壁的試驗(yàn)氨基酸大部分合成脂肪，部分以游離氨基酸形式存在，部分用于蛋白質(zhì)的合成及其他利用方式。隨著灌流的試驗(yàn)氨基酸濃度的增加其腸道蛋白質(zhì)、脂肪結(jié)合的試驗(yàn)氨基酸的絕對(duì)量也隨之增加，也就是說(shuō)新合成的

11、蛋白質(zhì)、脂肪量也隨之增加，其中例外的是草魚(yú)以Pro5.0mmol.L-1試驗(yàn)組合成蛋白質(zhì)和脂肪的量最多，但與高濃度10.0mmol.L-1組差異并不顯著(△S＜LSR0.05)。用于合成脂肪的試驗(yàn)氨基酸比例在鯽魚(yú)和草魚(yú)均極顯著高于蛋白質(zhì)(△S＞LSS0.01)，但草魚(yú)用于合成脂肪的試驗(yàn)氨基酸比例顯著高于鯽魚(yú)(△S＞LSD0.05)。各試驗(yàn)氨基酸濃度組中鯽魚(yú)腸道參加與蛋白質(zhì)合成的酪氨酸的絕對(duì)量均顯著高于草魚(yú)(△S＞LSS0.05)，尤其是

12、參與合成脂肪的酪氨酸的絕對(duì)量極顯著高于草魚(yú)(△S＞LSD0.01)，但從相對(duì)量上看，鯽魚(yú)利用游離酪氨酸合成蛋白質(zhì)和脂肪的能力顯著不如草魚(yú)。對(duì)于脯氨酸，鯽魚(yú)腸道參與蛋白質(zhì)合成的絕對(duì)量和相對(duì)量均顯著高于草魚(yú)(△S＞LSD0.05)，說(shuō)明鯽魚(yú)利用脯氨酸合成蛋白質(zhì)的能力高于草魚(yú)，但鯽魚(yú)利用脯氨酸合成脂肪的能力大體上不如草魚(yú)。 試驗(yàn)二：鯽魚(yú)離體腸道對(duì)四種蛋白質(zhì)飼料體外消化的酶解液中氨基酸吸收的研究 該試驗(yàn)采用腸道離體消化方法測(cè)定了

13、鯽魚(yú)腸道對(duì)魚(yú)粉、花生粕、菜粕、棉籽粕的體外消化率和氨基酸的生成效率。同時(shí)采用試驗(yàn)一的方法測(cè)定了鯽魚(yú)離體腸道對(duì)四種蛋白質(zhì)飼料體外消化酶解液中氨基酸的吸收速度。試驗(yàn)結(jié)果表明： 1.鯽魚(yú)腸道對(duì)魚(yú)粉、花生粕、菜粕、棉籽粕的體外消化率分別為48.51％、85.52％、60.64％、67.22％，其中以花生粕最高，魚(yú)粉最低，消化率彼此之間的差異均顯著(△S＞LSR0.05) 2.在酶水解過(guò)程中氨基酸的生成量逐漸增加，以生成的氨基酸量

14、占飼料量的百分比表示氨基酸的生成效率，在水解7h.時(shí)以魚(yú)粉最高為12.23％，其次是花生粕為12.14％、棉籽粕為11.23％、菜籽粕為6.78％。 3.采用離體腸道灌注試驗(yàn)系統(tǒng)和同位素示蹤方法測(cè)定了鯽魚(yú)腸道對(duì)四種蛋白質(zhì)飼料酶水解液中氨基酸的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)速度，以魚(yú)粉最高，在灌流40min時(shí)，速度為1.058mg/min.g腸，其次為花生粕0.782mg/min.g腸、棉籽粕0.679mg/min.g腸、最低為菜籽粕0.451mg/m