海馬電刺激對耐藥性顳葉癲癇大鼠腦組織CREB及GABA(A)受體α1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　建立杏仁核點燃耐藥性顳葉癲癇大鼠模型，經(jīng)過海馬電刺激治療后，檢測GABA（A）受體亞單位α1、CREB、p-CREB、ICER及BDNF在大鼠海馬組織中的表達(dá)變化，探究其在耐藥性癲癇及海馬電刺激中可能的機制。
　　方法:
　　選擇成年雄性SD大鼠100只，其中10只正常大鼠作為正常對照組，另外90只用于制作慢性杏仁核點燃模型，模型制作成功后用苯妥英鈉及苯巴比妥進行耐藥性癲癇模型的篩選，以1小時后ADT值的變

2、化為指標(biāo)，篩選出藥物敏感癲癇大鼠和耐藥性癲癇大鼠，并將耐藥性癲癇大鼠按照完全隨機數(shù)字表法分為耐藥對照組和海馬刺激組，通過觀察大鼠的行為學(xué)改變、腦電變化及病理學(xué)HE染色，以評價海馬電刺激的治療效果，治療結(jié)束后取四組大鼠海馬組織，行免疫組織化學(xué)染色方法和蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測 GABA（A）受體亞單位α1、CREB、p-CREB、ICER及 BDNF的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、成功建立耐藥性癲癇模型和海馬刺激治療模型，其腦電頻率

3、（正常組8.700±1.494 Hz，敏感組14.700±1.160 Hz，耐藥組19.800±1.686 Hz，刺激組15.800±1.033 Hz）、發(fā)作時間（敏感組36.100±6.557 s，耐藥組82.100±9.158 s，刺激組38.900±3.784 s）、ADT值（刺激前138.600±2.675 mA，刺激后226.800±4.638 mA）在組間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），治療過程未出現(xiàn)明顯的并發(fā)癥，海馬電

4、刺激治療耐藥性癲癇安全有效。
　　2、經(jīng)免疫組織化學(xué)染色方法檢測，CREB、p-CREB、ICER及 BDNF的陽性細(xì)胞表達(dá)在耐藥模型組（0.402±0.017，0.316±0.015，0.409±0.021，0.328±0.034）高于海馬刺激組（0.257±0.026，0.259±0.013，0.266±0.027，0.232±0.015）及藥物敏感組（0.244±0.039，0.249±0.022，0.281±0.029，0

5、.249±0.018），均高于正常組（0.177±0.013，0.176±0.016，0.178±0.011，0.176±0.019），組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；GABAARα1的陽性細(xì)胞表達(dá)在正常組（0.332±0.036）、海馬刺激組（0.229±0.014）及藥物敏感組（0.235±0.015）均高于耐藥模型組（0.147±0.011），組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3、經(jīng)蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測，CR

6、EB、p-CREB、ICER及 BDNF的蛋白含量（IOD值）在耐藥模型組（0.477±0.141，1.061±0.289，0.795±0.198，0.927±0.091）高于海馬刺激組（0.298±0.047，0.648±0.258，0.525±0.062，0.545±0.071）及藥物敏感組（0.361±0.151，0.602±0.130，0.508±0.066，0.556±0.058），均高于正常組（0.161±0.078，0.3

7、43±0.099，0.285±0.102，0.283±0.063），組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；GABA（A）受體亞單位α1的蛋白含量（IOD值）在正常組（1.850±0.334）、海馬刺激組（1.067±0.124）及藥物敏感組（1.066±0.103）均高于耐藥模型組（0.720±0.230），組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；4、檢測指標(biāo)之間相關(guān)性分析，GABA（A）受體亞單位α1與CREB、p-CREB、ICER、

8、BDNF呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、通過杏仁核電刺激慢點燃，并以苯妥英鈉及苯巴比妥藥物篩選后可成功建立理想的耐藥性癲癇大鼠模型；
　　2、海馬電刺激治療可以有效的抑制大鼠的發(fā)作級別及持續(xù)時間，降低腦電頻率，驗證海馬電刺激治療的有效性；
　　3、GABA(A)Rα1表達(dá)在海馬刺激組升高，CREB、p-CREB、ICER、BDNF的表達(dá)海馬刺激組中降低，提示其可能參與了耐藥性癲癇及海馬電刺激機