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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:建立耐苯妥因鈉及苯巴比妥鈉杏仁核點(diǎn)燃大鼠耐藥癲癇模型,觀察耐藥性癲癇大鼠海馬組織中N-甲基-D-天冬氨酸受體NR1、NR2B亞單位表達(dá)的變化,探討耐藥癲癇的可能機(jī)制。
方法:選擇100只健康的雄性Wistar大鼠,通過(guò)杏仁核慢點(diǎn)燃刺激,建立癲癇模型后,分別給予苯妥因鈉及苯巴比妥鈉腹腔注射各三次,1小時(shí)后測(cè)量后放電閾值(Afterdischarge threshold,ADT),ADT平均值不增加或增高小于20%為耐藥癲癇
2、組,ADT增高20%以上納入藥物敏感組,另選取8只正常大鼠為正常對(duì)照組。三組模型建立成功后立即處死大鼠,取海馬組織,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白免疫印記方法檢測(cè)NMDAR1、NMDAR2B的表達(dá)。
結(jié)果:1.模型制作情況:100只健康雄性Wistar大鼠,選取8只為正常對(duì)照,剩余大鼠建立癲癇點(diǎn)燃模型。完成點(diǎn)燃72只,成功點(diǎn)燃45只,發(fā)作級(jí)別均為5級(jí),點(diǎn)燃率62.5%。45只癲癇大鼠經(jīng)過(guò)苯妥因鈉及苯巴比妥鈉兩種一線抗癲癇藥物篩選,
3、篩選出耐藥性癲癇大鼠8只,耐藥率17.7%,成功建立了耐苯妥因鈉及苯巴比妥鈉的杏仁核點(diǎn)燃癲癇大鼠模型。
2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR:耐藥癲癇組海馬NR1、NR2B mRNA的相對(duì)表達(dá)量均高于對(duì)照組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。藥物敏感組 NR1、NR2B mRNA的相對(duì)表達(dá)量比正常大鼠海馬稍高,未見(jiàn)顯著差異(P>0.05)。
3.蛋白免疫印記:耐藥癲癇組海馬NR1、NR2B的蛋白相對(duì)表達(dá)量均高于對(duì)照組和藥物敏感
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