鮑曼不動桿菌感染臨床特點及抗菌藥物選擇的體外研究.pdf

1、本文從以下幾部分進(jìn)行了論述：
　　第一章:鮑曼不動桿菌感染臨床特點
　　目的：
　　本研究旨在分析醫(yī)院獲得性鮑曼不動桿菌感染的人群分布，菌株耐藥性分析以及感染鮑曼不動桿菌患者的預(yù)后評估。并進(jìn)一步探討了感染高度耐藥菌株與感染普通耐藥菌株的人群基礎(chǔ)狀況以及預(yù)后的差異。為臨床預(yù)防以及經(jīng)驗性治療鮑曼不動桿菌感染奠定基礎(chǔ)，并為鮑曼不動桿菌感染抗菌藥物選擇的研究提供方向。
　　方法：
　　本研究收集了2014年1月至2

2、015年12月間，山東大學(xué)齊魯醫(yī)院各臨床科室診斷為鮑曼不動桿菌感染的病例共842例，入選標(biāo)準(zhǔn)包括:臨床標(biāo)本中分離出鮑曼不動桿菌;有相應(yīng)的感染癥狀、體征、影像學(xué)表現(xiàn);有相應(yīng)治療。其中女性患者214人，男性患者628人。應(yīng)用exel記錄以及SPSS22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。統(tǒng)計分析了鮑曼不動桿菌感染的人群的總體特點，包括性別，年齡，科室分布，以及感染菌株耐藥情況，患者基礎(chǔ)狀況以及預(yù)后分析，并分析比較了感染高度耐藥菌株與感染普通耐藥菌株的人群

3、基礎(chǔ)狀況以及預(yù)后的差異。
　　結(jié)果：
　　所有基礎(chǔ)狀況中，出現(xiàn)鮑曼不動桿菌感染之前應(yīng)用廣譜抗生素治療的比率最高為76.25％;其次為合并其他細(xì)菌或真菌感染的患者，占所有患者的比率為57.6％;所有患者中有人工氣道的占54.51％，其中氣管插管患者占21.61％，氣管切開患者占32.9％;前述三種基礎(chǔ)情況，在所有感染鮑曼不動桿菌的患者中占到半數(shù)以上。近期有外傷或者手術(shù)史的患者占所有患者的45.49％;所有患者中有冠心病的占36

4、.34％，有糖尿病的占18.41％，有慢性阻塞性肺病的占11.05％。
　　患者的轉(zhuǎn)歸情況，其中治愈的患者為8.67％，多為新生兒;好轉(zhuǎn)的患者所占比率最高為63.66％，粗死亡率為13.06％，余14.61％為自動出院。
　　高度耐藥組與非高度耐藥組相比，14個項目中，兩組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義的有8項，包括:年齡、COPD、CAD、氣管切開、人工氣道、前期抗生素治療、住院天數(shù)以及病死率;兩組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義的有6項，包括

5、:男性、女性、DM、氣管插管、外傷或手術(shù)、合并其他細(xì)菌或真菌感染。
　　結(jié)論：
　　1.鮑曼不動桿菌感染患者以男性居多，老年人為主。偶有小規(guī)模暴發(fā)，可呈現(xiàn)一定高峰期。
　　2.鮑曼不動桿菌感染患者臨床分布廣，涉及40個臨床科室，其中ICU患者最多。HAP最常見。
　　3.鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素、頭孢哌酮舒巴坦、亞胺培南三種臨床常用抗菌藥物耐藥形勢嚴(yán)峻。
　　4.年齡大、患有COPD或CAD、前期應(yīng)用抗生素、

6、氣管切開增加感染高度耐藥鮑曼不動桿菌的風(fēng)險。
　　5.感染高度耐藥鮑曼不動桿菌會延長患者住院時間，增加病死率。
　　第二章:泛耐藥鮑曼不動桿菌抗菌藥物選擇的體外研究
　　本研究分為三部分進(jìn)行。
　　第一部分
　　本實驗首先應(yīng)用微量肉湯法檢測了已知可能對耐藥的鮑曼不動桿菌具有抗菌活性的粘桿菌素、利福平、舒巴坦、替加環(huán)素四種抗菌藥物單獨的體外抗菌效應(yīng)。后應(yīng)用棋盤法測定四種抗菌藥物兩兩聯(lián)合的聯(lián)合抗菌效應(yīng)，以篩選出

7、高效的對抗泛耐藥鮑曼不動桿菌感染的抗菌藥物及藥物組合，為泛耐藥鮑曼不動桿菌感染的臨床治療提供新選擇。
　　方法：
　　本實驗于2012.11至2013.06期間收集了來自臨床標(biāo)本的泛耐藥鮑曼不動桿菌菌株，對于連續(xù)多次培養(yǎng)出泛耐藥鮑曼不動桿菌的病人，只取一次培養(yǎng)出的菌株。
　　紙片法重篩:紙片法檢測了所收集鮑曼不動桿菌菌株對氨曲南、哌拉西林、替卡西林/克拉維酸、頭孢曲松、頭孢他定、美羅培南、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、慶大霉素

8、、阿米卡星、妥布霉素、磺胺甲噁唑、四環(huán)素的耐藥性。
　　最終篩選出符合標(biāo)準(zhǔn)的泛耐藥菌株25株，所收集標(biāo)本中有21株來自痰培養(yǎng)，2株來自血培養(yǎng)，2株來自傷口分泌物培養(yǎng)。
　　用微量肉湯稀釋法分別檢測了粘桿菌素、利福平、舒巴坦、替加環(huán)素四種已知對泛耐藥鮑曼不動桿菌可能有效的抗菌藥物的最小抑菌濃度(MIC)，并應(yīng)用棋盤法檢測了前述四種抗菌藥物兩兩聯(lián)合的部分抑菌濃度(FIC)，計算出部分抑菌濃度指數(shù)(FICI)。
　　結(jié)果：<

9、br>　　1.單一用藥抗菌效應(yīng)
　　利福平MIC范圍0.5-8 ug/mL，MIC502 ug/mL，MIC908 ug/mL，敏感率44％;
　　粘桿菌素MIC范圍2-16 ug/mL，MIC502 ug/mL，MIC908 ug/mL，敏感率88％;
　　舒巴坦MIC范圍4-≥128 ug/mL，MIC5032 ug/mL，MIC9064 ug/mL，敏感率16％;
　　替加環(huán)素MIC范圍1-4 ug/mL，

10、MIC502 ug/mL，MIC902 ug/mL，敏感率92％。
　　2.兩兩聯(lián)合FICI
　　所有六種藥物組合里，舒巴坦與替加環(huán)素協(xié)同作用最強，利福平與替加環(huán)素次之，粘桿菌素與利福平再次之，粘桿菌素與替加環(huán)素聯(lián)合抗菌效應(yīng)最差。所有藥物組合均未出現(xiàn)拮抗效應(yīng)。
　　3.一種抗生素分別與0.5MIC及0.25MIC另一種抗生素聯(lián)合
　　結(jié)論：
　　1.粘桿菌素、替加環(huán)素具有良好的體外抗菌效果，利福平單藥抗菌效

11、果欠理想，而舒巴坦單獨應(yīng)用對泛耐藥鮑曼不動桿菌體外抗菌作用最差。
　　2.粘桿菌素、利福平、舒巴坦及替加環(huán)素兩兩聯(lián)合可產(chǎn)生更有效的抗菌效應(yīng)。
　　第二部分
　　本研究第二部分，檢測了西他沙星對泛耐藥鮑曼不動桿菌的體外抗菌活性及其與粘桿菌素、利福平、舒巴坦、替加環(huán)素聯(lián)合的體外抗菌效應(yīng)。為臨床泛耐藥鮑曼不動桿菌感染的控制提供更多選擇。
　　方法：
　　本實驗后又于2013.11至2014.05收集了來自臨床標(biāo)本

12、的泛耐藥鮑曼不動桿菌菌株，紙片法重新檢測鮑曼不動桿菌菌株對氨曲南、哌拉西林、替卡西林/克拉維酸、頭孢曲松、頭孢他定、美羅培南、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、慶大霉素、阿米卡星、妥布霉素、磺胺甲噁唑、四環(huán)素的耐藥性。得到符合標(biāo)準(zhǔn)的泛耐藥菌株24株，其中21株來自痰培養(yǎng)，1株來自血培養(yǎng)，1株來自腦脊液培養(yǎng)，1株來自尿培養(yǎng)。微量肉湯稀釋法檢測了西他沙星及粘桿菌素、利福平、舒巴坦、替加環(huán)素的MIC，以及西他沙星與四種抗菌藥物聯(lián)合的FIC及FICI。統(tǒng)計

13、分析了西他沙星分別與0.5MIC及0.25MIC另一種抗生素聯(lián)合時，其MIC的變化規(guī)律;以及與0.5MIC及0.25MIC西他沙星聯(lián)合時，四種抗菌藥物MIC的變化規(guī)律。
　　結(jié)果：
　　1.與第一部分結(jié)果相比，替加環(huán)素的敏感率由92％下降至54.17％;粘桿菌素的敏感率由88％下降至62.5％;利福平的敏感率由44％下降至41.67％;舒巴坦的敏感率基本無變化。近一年來，泛耐藥鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素的敏感性明顯下降，下降比率

14、有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.西他沙星與四種抗菌藥物兩兩聯(lián)合FICI
　　3.西他沙星與0.5MIC及0.25MIC的另一種抗生素聯(lián)合
　　結(jié)論：
　　1.西他沙星對泛耐藥鮑曼不動桿菌具有良好的抗菌效果。
　　2.泛耐藥鮑曼不動桿菌菌株對粘桿菌素、利福平、替加環(huán)素的耐藥能力均增強，其中尤以替加環(huán)素最為明顯。
　　3.西他沙星與舒巴坦、粘桿菌素、利福平、替加環(huán)素兩兩聯(lián)合時有較好的聯(lián)合抗菌效應(yīng)。
　　第三

15、部分
　　第二部分實驗結(jié)果顯示，四種藥物組合里，西他沙星與舒巴坦的聯(lián)合體外抗菌效應(yīng)最佳，為進(jìn)一步明確這兩種抗菌藥物的體外殺菌效果，我們對2014年11月至2015年12月收集的50株臨床分離的XDR鮑曼不動桿菌進(jìn)行了體外殺菌實驗，并描繪相關(guān)時間-殺菌曲線。
　　方法：
　　XDR鮑曼不動桿菌菌株的分離及保存方法同前，不予贅述。
　　舒巴坦及西他沙星對50株XDR鮑曼不動桿菌臨床分離株的MIC及兩種抗菌藥物聯(lián)合的F

16、IC及FICI的檢測，方法同前，同樣不予贅述。
　　時間-殺菌曲線:
　　按耐藥性的不同，可以把所分離的菌株分為4組:對舒巴坦和西他沙星均敏感記為SS，對舒巴坦耐藥、對西他沙星敏感記為NS，對舒巴坦敏感、對西他沙星耐藥記為SN，對舒巴坦及西他沙星均耐藥記為NN。從前述四組中分別選取一株作為代表菌株，進(jìn)行時間-殺菌曲線檢測。
　　細(xì)菌培養(yǎng)及菌液稀釋同前，于稀釋畢的菌液中分別加入0.5MIC或1.0MIC的單藥或藥物組合。

17、放入35℃恒溫箱中孵育，于0h，1h，2h，4h，6h，12h，24h，七個時間點取培養(yǎng)液倍比稀釋，計數(shù)菌落，計算培養(yǎng)液中的細(xì)菌濃度，取其對數(shù)值作為縱坐標(biāo)，時間為橫坐標(biāo)，繪制時間-殺菌曲線。
　　結(jié)果：
　　藥物濃度為1.0MIC時，西他沙星對所有四株菌株均表現(xiàn)出快速殺菌作用。西他沙星-舒巴坦藥物組合，在濃度為0.5MIC時，體外用藥24h，對菌株SS和NS表現(xiàn)出殺菌作用，對除菌株NN以外的三株菌株均表現(xiàn)出協(xié)同殺菌效應(yīng)。西他