氟化鉀和高氟茶細(xì)胞及遺傳毒性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：氟是人體必需的微量元素，氟既是天然的致地球化學(xué)性疾病的病因，又是工業(yè)生產(chǎn)和生活燃煤的重要污染物。氟與鈣磷代謝有密切關(guān)系，過(guò)量攝入氟可累及機(jī)體各組織器官，主要表現(xiàn)在對(duì)骨骼和牙齒的損害。隨著工業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展，人群暴露于氟的機(jī)會(huì)愈來(lái)愈多，有關(guān)氟的毒性和茶葉的安全性問(wèn)題引起了人們的關(guān)注，尤其是潛在的遺傳毒性的研究已經(jīng)開(kāi)始受到重視。我們選擇氟化鉀和對(duì)環(huán)境中氟有較強(qiáng)富集作用的茶葉作為研究對(duì)象，旨在了解氟化鉀和高氟茶的細(xì)胞毒性、致突變性和DNA損

2、傷，試圖探討氟的遺傳毒性，并為茶葉的安全飲用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：用氟離子選擇電極法測(cè)定綠茶A、綠茶B和對(duì)照茶浸提液中氟化物的含量。通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)拒染法和MTT比色法檢測(cè)氟化鉀和不同濃度的茶葉浸提液對(duì)V79細(xì)胞作用不同時(shí)間后細(xì)胞存活率的變化，了解濃度-時(shí)間-毒性效應(yīng)關(guān)系；采用鼠傷寒沙門菌/回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試驗(yàn))，探討氟化鉀和2種高氟茶的致突變性；采用單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)研究氟化鉀和高氟茶浸提液對(duì)V79細(xì)胞的DNA損傷程度及類型，

3、比較含不同氟含量的茶湯對(duì)DNA損傷程度的差別。 結(jié)果：綠茶A、綠茶B和對(duì)照茶浸提液中氟化物的濃度分別為2330mg/kg、1390mg/kg、7.53mg/kg。綠茶A、綠茶B的氟含量超過(guò)了農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)；在臺(tái)盼藍(lán)拒染法和MTT比色法都檢測(cè)到：氟化鉀、綠茶A和綠茶B茶湯對(duì)V79細(xì)胞活性有抑制作用，并具有明顯的時(shí)間-效應(yīng)和劑量-效應(yīng)關(guān)系；在臺(tái)盼藍(lán)拒染法試驗(yàn)中，從4h和24h的半數(shù)抑制濃度知，氟化鉀的IC50明顯低于三種茶葉，且對(duì)照茶

4、>綠茶B>綠茶A，在4h(2.50～10.00mg/mL劑量范圍)和24h作用后，氟化鉀、綠茶A和綠茶B的細(xì)胞存活率明顯低于對(duì)照茶(p<0.05)，且綠茶A的毒性大于綠茶B(p<0.05)。在MTT試驗(yàn)中，氟化鉀和綠茶A、綠茶B的細(xì)胞存活率明顯低于對(duì)照茶(p<0.05)，且在作用4～24h時(shí)，綠茶A的細(xì)胞存活率低于綠茶B(p<0.05)，氟化鉀和3種茶的各時(shí)點(diǎn)的IC50分析發(fā)現(xiàn)，平均IC50分別為28.18mg/mL(對(duì)照茶)>23.2

5、4mg/mL(綠茶B)>20.26mg/mL(綠茶A)>0.93 mg/mL(氟化鉀)；Ames實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)氟化鉀和高氟茶綠茶A和綠茶B均無(wú)致突變性，但氟化鉀在5000ug/皿劑量上對(duì)TA98、TA100、TA102三菌株有明顯的抑制作用：在單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)中，氟化鉀、綠茶A和綠茶B浸提液可引起V79細(xì)胞的DNA損傷，且隨著濃度的增加而加重。氟化鉀的DNA損傷作用(p<0.05)>綠茶A(p<0.05)>綠茶B(p<0.05)。而對(duì)照茶在