雷帕霉素及氯化鋰對(duì)大鼠肺纖維化的影響及機(jī)制.pdf

1、目的：研究雷帕霉素及氯化鋰對(duì)博來霉素致大鼠肺纖維化的影響,以其對(duì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和IL-17等多種細(xì)胞因子的影響角度,探討其對(duì)肺纖維化的影響及其機(jī)制。
　　方法：采用氣管內(nèi)注入博來霉素(5mg/kg)的方法制造大鼠肺纖維化模型。對(duì)照組采用氣管內(nèi)注入生理鹽水(1.25ml/kg)的方法制造陰性對(duì)照。氣管灌注博來霉素后第三天給予雷帕霉素干預(yù)組大鼠雷帕霉素灌胃(1mg/kgperday),連續(xù)十天達(dá)到達(dá)到雷帕霉素對(duì)肺纖維化的干預(yù)。氣管灌注博

2、來霉素后第三天給予氯化鋰干預(yù)組大鼠氯化鋰灌胃(120mg/kgperday),連續(xù)十天到達(dá)到氯化鋰對(duì)肺纖維化的干預(yù)。在氣管灌注博來霉素后第28天將各組大鼠處死。大鼠肺組織病理切片HE染色,進(jìn)行Ashcroft評(píng)分,評(píng)測(cè)各組大鼠肺纖維化的嚴(yán)重程度。大鼠肺組織病理切片免疫組化染色,檢測(cè)IL-6、IL-17、TGF-β和IL-2表達(dá),并通過積分光密度評(píng)測(cè)表達(dá)水平情況。各組大鼠處死過程中取外周血,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)外周血T細(xì)胞亞群中CD8+CD2

3、5+Foxp3+細(xì)胞、CD4+CD25+Foxp3+等細(xì)胞的比例進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：肺組織病理學(xué)HE染色結(jié)果顯示:雷帕霉素干預(yù)組肺纖維化嚴(yán)重程度較博來霉素組明顯減輕,Ashcroft評(píng)分存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);氯化鋰干預(yù)組肺纖維化嚴(yán)重程度較博來霉素組無明顯減輕,Ashcroft評(píng)分無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.15>0.05)。免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示:IL-6、IL-17、TGF-β和IL-2表達(dá)水平在博來霉素組和氯化鋰干預(yù)組

4、均較正常對(duì)照組和雷帕霉素干預(yù)組升高(P<0.01)。雷帕霉素組的IL-17、TGF-β的表達(dá)水平較對(duì)照組升高(P<0.01)。氯化鋰組IL-6、IL-17、TGF-β和IL-2的表達(dá)水平與博來霉素組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各組總體樣本數(shù)據(jù)行相關(guān)分析提示IL-6和IL-17表達(dá)水平具有正相關(guān)性,IL-17與TGF-β也具有正相關(guān)性。大鼠外周血流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果及其相關(guān)性分析:雷帕霉素干預(yù)組和氯化鋰干預(yù)組CD4+CD25+Foxp3+細(xì)胞占CD4+C

5、D25+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞和淋巴細(xì)胞百分比較對(duì)照組和博來霉素組升高,CD8+CD25+Foxp3+細(xì)胞的相關(guān)比例也較對(duì)照組和博來霉素組升高,并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。博來霉素組CD8+CD25+Foxp3+細(xì)胞占CD8+CD25+細(xì)胞百分比較對(duì)照組高,并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。
　　結(jié)論：肺纖維化的發(fā)病機(jī)制涉及到多種細(xì)胞及多種細(xì)胞因子,調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和Th17細(xì)胞之間的平衡被打破也可能與之有關(guān)。雷帕霉素具有抑制肺纖維