絞股藍皂苷對谷氨酸所致大鼠海馬組織損傷的保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:谷氨酸(glutamate,Glu)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一種重要的興奮性神經(jīng)遞質,參與許多神經(jīng)功能活動,不僅具有營養(yǎng)神經(jīng),促使神經(jīng)元生長發(fā)育及軸突生長等重要生理作用,同時也是一種神經(jīng)毒素,由于谷氨酸過度增加而引起的神經(jīng)毒性可導致腦組織損傷。一方面,谷氨酸的興奮性神經(jīng)毒性作用是導致神經(jīng)細胞損傷的重要機制,許多因素參與了這個過程,已知氧自由基發(fā)揮著特別重要的作用;另一方面,谷氨酸還可通過抑制細胞膜上谷氫酸/胱氨酸逆轉運子的作用導致氧化性神

2、經(jīng)毒性。缺血、腦卒中等急性神經(jīng)損傷及阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)、帕金森病(Parkinson's disease,PD)等慢性神經(jīng)退行性疾病都與谷氨酸的神經(jīng)毒性密切相關。 絞股藍(Gynostemma pentaphy11um(Thunb)Makino)為葫蘆科絞股藍屬多年生草質藤本植物,其主要有效成分為絞股藍總皂苷(gypenosides,GP)。近20年來,相關的研究證實GP具有多種藥理活性,

3、包括抗癌、抗衰老、免疫調節(jié)、降血脂以及顯著的抗氧化作用等,但有關GP對中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷保護作用的研究極少。辛華教授等應用體外培養(yǎng)的胎鼠大腦皮層神經(jīng)細胞,建立谷氨酸損傷模型和GP保護模型,從細胞和分子水平對GP的神經(jīng)保護作用及其機制進行了大量研究,證實GP可以拮抗谷氨酸誘導的神經(jīng)細胞損傷。本研究以側腦室注射谷氨酸造成大鼠海馬組織損傷,從整體水平研究GP對谷氨酸誘導的神經(jīng)損傷的保護作用及其機制,為GP用于防治谷氨酸大量釋放造成的神經(jīng)損傷和中

4、樞神經(jīng)退行性疾病提供實驗依據(jù)。 方法:Wistar大鼠100只,隨機分為假手術組、谷氨酸損傷組、GP低(200mg/kg)、中(400mg/kg)和高(800mg/kg)劑量組。GP組預先灌胃給藥10d。大鼠經(jīng)側腦室注射谷氨酸后2h取腦,測定各組大鼠海馬組織勻漿中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性及產(chǎn)生羥自由基的能力;制備海馬組織切片,HE染色,觀察各組病理形態(tài)學變化;采用免

5、疫組織化學方法檢測α-氨基-3-梭基-5-甲基惡唑-4-丙酸(AMPA)受體亞單位GluR2蛋白表達:RT-PCR法檢測AMPA受體亞單位GluR2mRNA表達水平。 結果:谷氨酸損傷組大鼠海馬組織中MDA含量和羥自由基生成能力均顯著高于假手術組(P<0.05),而SOD和GSH-PX活性降低(P<0.05);與谷氨酸損傷組比較,GP組MDA含量和產(chǎn)生羥自由基的能力顯著降低(P<0.01),SOD和GSH-PX活性明顯增強(P<

6、0.01);海馬組織切片HE染色顯示,GP組神經(jīng)元變性及壞死較谷氨酸損傷組明顯減少;免疫組化結果顯示,與假手術組比較,谷氨酸損傷組AMPA受體亞單位GluR2蛋白mRNA表達水平明顯下調,GP組表達水平則顯著增高。顯微圖像及統(tǒng)計分析結果表明:與假手術組相比,谷氨酸損傷組大鼠海馬組織GluR2陽性神經(jīng)元平均光密度值降低(P<0.01);RT-PCR法檢測結果表明,谷氨酸損傷組GluR2mRNA表達水平下調,GP組表達水平則明顯增高。綜合實

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