神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3對(duì)海馬神經(jīng)元缺氧和谷氨酸損傷保護(hù)機(jī)制的研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3對(duì)海馬神經(jīng)元缺氧和谷氨酸損傷保護(hù)機(jī)制的研究姓名：王虔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：程焱于士柱2002.6.1大鼠前腦缺血及再灌流模型以及原位雜交和TUNEL檢測(cè)技術(shù)，研究了缺血及’再灌流不同時(shí)程海馬各區(qū)NT3的表達(dá)變化及該變化與神經(jīng)元凋亡的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)，缺血后海馬CAl、CAP、CA3區(qū)和齒狀回NT3mRNA表達(dá)確有下降，但下降趨勢(shì)并不完全相同，其中尤以CAl區(qū)下降幅度最大且持續(xù)時(shí)間最

2、長(zhǎng)，而以齒狀回下降幅度較小且恢復(fù)迅速，并且NT。3表達(dá)的易感區(qū)域也是對(duì)缺血、缺氧耐受相對(duì)較差的區(qū)域。相關(guān)分析顯示，在缺血和再灌流不同時(shí)間在海馬各’區(qū)10T3的表達(dá)水平均與神經(jīng)元凋亡水平呈顯著性負(fù)相關(guān)，從而提示NT3表達(dá)的減少可能是造成缺血后神經(jīng)元凋亡的一個(gè)重要原因。此后，我們采用體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元，建立了單純?nèi)毖鹾凸劝彼釗p傷兩種模型，分別代表導(dǎo)致凋亡的非興奮性氨基酸毒性機(jī)制和興奮性氨基酸毒性機(jī)制，一廠以便摒除體內(nèi)復(fù)雜因素對(duì)神經(jīng)元凋亡的影

3、響。I在此基礎(chǔ)上，利用腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的＼方式向神經(jīng)元轉(zhuǎn)導(dǎo)Nr3eDNA，并誘導(dǎo)其在神經(jīng)元的表達(dá)。同時(shí)采用Western印漬的方式檢測(cè)內(nèi)、外源性NT3在海馬神經(jīng)元損傷過程中的表達(dá)情況，通過免疫組織化學(xué)方法觀察外源性NT3對(duì)Bcl2表達(dá)的影響，通過nn旺I方法觀察NT3和Bcl2的表達(dá)對(duì)神經(jīng)元凋亡的影響。結(jié)果顯示，正常情況下，體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元即可表達(dá)一定水平的NT3和Bel2：缺氧或谷氨酸損傷均可使NT3和Bel2表達(dá)下降；腺病毒能夠?qū)T