兒童過敏性哮喘特異性免疫治療過程中IL-10、TGF-β1和CD4+CD25+T細胞的變化.pdf

1、背景與目的：過敏性支氣管哮喘是氣道慢性炎癥性疾病,該病的確切發(fā)病機制仍不十分清楚,長期以來,Th1/Th2比例失衡理論已被多數(shù)人接受,認為過敏性哮喘是Th2細胞過度分化導致的變態(tài)反應性疾病。然而,傳統(tǒng)的Th1/Th2比例失衡理論并不能解釋所有的發(fā)病機制。大量研究提示,抑制性細胞因子IL-10、TGF-β1和CD4+CD25+ T細胞可能在哮喘的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用,現(xiàn)已引起人們的廣泛關(guān)注。IL-10和TGF-β1是主要的免疫抑制性細

2、胞因子。IL-10可能是通過直接抑制T細胞增殖和分泌細胞因子、誘導免疫無能T細胞產(chǎn)生、抑制抗原遞呈細胞(DC、單核/巨噬細胞)間接抑制T細胞應答、抑制特異性IgE分泌增加IgG4合成,抑制氣道炎癥,最終抑制哮喘的發(fā)生發(fā)展。TGF-β1在哮喘中的作用十分復雜,至今仍有爭議。大多數(shù)認為局部的TGF-β1主要促進炎癥的發(fā)展,而全身的TGF-β1則可能起到抑制炎癥的作用。CD4+CD25+T細胞包含CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞(regulat

3、ory T cell,Treg)和活化的CD4+ T細胞,其中包含的CD4+CD25+ Treg是近來研究的熱點,屬于免疫調(diào)節(jié)細胞,可抑制免疫性疾病的發(fā)展。CD4+CD25+ Treg不僅可以抑制Th1細胞,還可抑制Th2細胞應答,并且對后者的作用更強。隨著研究的深入近年發(fā)現(xiàn)在人類僅僅CD4+CD25high Treg發(fā)揮強大的免疫調(diào)節(jié)功能。對于哮喘的治療,長期以來都是以抗炎、解痙為主。過敏原特異性免疫治療(allergen speci

4、fic immunotherapy,SIT)是唯一可能改變過敏性哮喘自然病程的對因治療,但其機制仍不十分清楚。本文通過觀察對塵螨過敏的兒童哮喘患者SIT的治療效果和治療前后外周血單個核細胞(peripheralblood mononuclear cells,PBMCs)中IL-10、TGF-β1 mRNA表達情況以及CD4+CD25+ T細胞、CD4+CD25high T細胞占CD4+ T細胞的百分比,研究它們在SIT中的作用,初步探討

5、兒童過敏性哮喘特異性免疫治療的機制,從而為哮喘的防治提供新思路。
　　方法：本實驗選取鄭州大學第一附屬醫(yī)院兒科門診40例過敏性哮喘患兒,男24例,女16例,平均年齡8.42歲。所有的病人都有明確的哮喘病史和癥狀,符合支氣管哮喘診斷標準,皮膚點刺試驗塵螨抗原陽性,采用Alutard屋塵螨變應原制劑(ALK丹麥)脫敏方法進行標準化脫敏治療。根據(jù)其治療時間分為SIT治療前組、治療1年后組和治療2年后組三組。分別于治療前、治療1年后、治療

6、2年后采集外周靜脈血。利用SYBR GreenⅠ熒光定量PCR的方法檢測每組標本PBMCs中IL-10和TGF-β1 mRNA的表達情況;利用流式細胞技術(shù)檢測每組標本CD4+CD25+ T細胞、CD4+CD25high T細胞分別占CD4+ T細胞的百分比;同時,觀察SIT的臨床療效。
　　結(jié)果：采用統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果隨著特異性免疫治療時間的延長,IL-10 mRNA的表達在治療1年后組顯著升高,是治療前組的3.29倍

7、,治療2年后組表達水平又顯著降低,是治療前組的1.01倍;TGF-β1 mRNA的表達在治療1年后組稍有降低,但治療2年后組又回升,整體變化不大。CD4+CD25+ T細胞占CD4+ T細胞的百分比在特異性免疫治療前后無顯著差異(P>0.05);CD4+CD25high T細胞占CD4+ T細胞的百分比在特異性免疫治療后1年顯著增高(P<0.05),治療后2年仍維持高水平?；純号R床癥狀明顯減輕。
　　結(jié)論：本實驗進一步證實了哮喘患