柳穿魚(yú)黃素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究.pdf

1、柳穿魚(yú)黃素是黃酮類的化合物，主要存在于大薊科飛機(jī)草等植物當(dāng)中。柳穿魚(yú)黃素具有促凋亡的活性，但目前其促凋亡活性的機(jī)制還不是很清楚。孤兒核受體Nur-77的經(jīng)典的促凋亡機(jī)制是Nur-77出核后定位到線粒體上，并與bcl-2相互作用，引發(fā)線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。論文中我們發(fā)現(xiàn)柳穿魚(yú)黃素能夠通過(guò)影響Nur-77的亞細(xì)胞定位來(lái)調(diào)節(jié)Nur-77/bcl-2介導(dǎo)的凋亡通路。我們的數(shù)據(jù)顯示，柳穿魚(yú)黃素能夠有效的激活JNK信號(hào)通路，并通過(guò)JNK信號(hào)通路磷酸

2、化Nur-77，而Nur-77磷酸化是Nur-77出核的必要條件。使用JNK的抑制劑可以明顯的減弱柳穿魚(yú)黃素對(duì)Nur-77的磷酸化，以及柳穿魚(yú)黃素引起的細(xì)胞凋亡。我們的研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)有趣的現(xiàn)象，JNK信號(hào)通路的激活以及Nur-77的磷酸化都依賴于核受體RARγ的存在。利用siRNA干擾技術(shù)，沉默掉RARγ后我們發(fā)現(xiàn)Nur-77的磷酸化以及JNK信號(hào)通路的激活都被明顯的減弱。RARγ與Nur-77存在著密切的調(diào)控關(guān)系，我們發(fā)現(xiàn)在不同的細(xì)胞

3、系中轉(zhuǎn)入外援的RARγ都能夠在不同程度上上調(diào)Nur-77的水平。本論文數(shù)據(jù)顯示RARγ可以穩(wěn)定Nur-77的蛋白水平。二者之間存在直接的相互作用，并且柳穿魚(yú)黃素可以加強(qiáng)這一作用。
　　柳穿魚(yú)黃素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡也是依賴于Nur-77的出核，我們使用LMB抑制Nur-77的出核后發(fā)現(xiàn)，柳穿魚(yú)黃素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡也被明顯的削弱。我們的數(shù)據(jù)還顯示Nur-77出核定位到線粒體上使Bcl-2減少，釋放出有活性的Bax從而影響線粒體的膜電位釋放細(xì)