一種新型姜黃素類似物誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制研究.pdf

1、姜黃素作為抗腫瘤藥物的研究已有近30年，其溶性不佳以及靶點(diǎn)眾多是影響其體內(nèi)抗腫瘤活性的主要原因。前期研究中，我們合成了一系列姜黃素的類似物，發(fā)現(xiàn)其水溶性和對(duì)硫氧還蛋白還原酶（TrxR）活性的抑制能力都高于姜黃素本身。本文通過(guò)體外研究模型探索了姜黃素類似物B5抗宮頸癌的活性以及其作用機(jī)制。這為姜黃素類似物的開(kāi)發(fā)以及新型TrxR抑制劑的研究豐富了內(nèi)容。
　　通過(guò)細(xì)胞體外培養(yǎng)和MTT檢測(cè)，選擇了CaSki和SiHa兩株宮頸癌細(xì)胞作為研究

2、模型。通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)了B5對(duì)CaSki和SiHa細(xì)胞周期的阻滯和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用；通過(guò)Westen Blot檢測(cè)了B5對(duì)凋亡相關(guān)蛋白的影響；通過(guò)DCFH-DA探針檢測(cè)了B5誘導(dǎo)CaSki和SiHa細(xì)胞株中ROS的積累情況；通過(guò)JC-1探針檢測(cè)了B5誘導(dǎo)CaSki和SiHa細(xì)胞株線粒體膜電位的變化；并進(jìn)一步驗(yàn)證了B5在細(xì)胞內(nèi)對(duì)Trx系統(tǒng)的影響。
　　結(jié)果：姜黃素類似物B5具有顯著的體外抗腫瘤活性，其對(duì)CaSki和SiHa兩株細(xì)

3、胞的IC50值分別為5.3μM和6.2μM左右，遠(yuǎn)低于姜黃素對(duì)這兩株細(xì)胞的IC50值（姜黃素對(duì)兩株細(xì)胞的IC50值分別為B5的4.5倍和3.6倍）。并且這種抑制作用具有濃度依耐性。B5能誘導(dǎo)CaSki和SiHa細(xì)胞凋亡以及G2/M期細(xì)胞周期阻滯；B5誘導(dǎo)了兩株細(xì)胞中ROS呈時(shí)間依賴性的積累，以及氧化狀態(tài)的硫氧還蛋白（Trx）呈濃度依賴性的積累。進(jìn)而B(niǎo)5誘導(dǎo)兩株細(xì)胞中線粒體膜電位下降和線粒體損傷。B5能夠呈濃度依賴性的促進(jìn)Caspase-