神經(jīng)因素對(duì)缺血肢體血管生成和骨骼肌纖維重塑影響的研究.pdf

1、目的:(1)構(gòu)建小鼠后肢缺血模型，并在此基礎(chǔ)上去除坐骨神經(jīng)支配，觀察神經(jīng)因素對(duì)缺血肢體VEGF表達(dá)、代償性血管生成和骨骼肌纖維類型變化的影響。(2)對(duì)小鼠后肢缺血模型進(jìn)行NGF和VEGF基因轉(zhuǎn)染，評(píng)價(jià)NGF在缺血肢體血管生成和骨骼肌纖維重塑中的作用，探討NGF與VEGF在血管生成和骨骼肌纖維重塑中的關(guān)系。
　　方法:(1)建立單純后肢缺血模型和后肢缺血+去神經(jīng)支配模型，術(shù)后對(duì)患肢腓腸肌進(jìn)行重量測(cè)定，并對(duì)標(biāo)本進(jìn)行HE染色，CD31和

2、PCNA免疫組化染色，肌球蛋白ATP酶染色，ELISA檢測(cè)NGF和VEGF表達(dá)量。(2)對(duì)小鼠后肢缺血模型進(jìn)行NGF和VEGF-ATF基因轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染后對(duì)缺血肢體功能進(jìn)行評(píng)估，測(cè)定患肢腓腸肌重量，并取腓腸肌組織進(jìn)行HE染色、PCNA和CD31免疫組化染色，肌球蛋白ATP酶染色，ELISA檢測(cè)NGF、VEGF表達(dá)量。
　　結(jié)果:(1)術(shù)后第7天，缺血+去神經(jīng)支配組的患肢缺血程度評(píng)估1～4級(jí)的比例高于單純?nèi)毖M，而0級(jí)的比例低于單純?nèi)毖?/p>

3、組，兩組總體差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與正常對(duì)照組相比，單純?nèi)毖M和缺血+去神經(jīng)支配組小鼠的腓腸肌萎縮明顯，其相對(duì)肌肉重量均顯著降低，且缺血+去神經(jīng)支配組比單純?nèi)毖M降低更明顯(P＜0.05)。術(shù)后第28天，缺血+去神經(jīng)支配組與單純?nèi)毖M相比，其內(nèi)皮細(xì)胞增殖指數(shù)、毛細(xì)血管密度、NGF和VEGF表達(dá)量均明顯降低(P＜0.05);術(shù)后第28天，缺血+去神經(jīng)支配組的腓腸肌Ⅱ型肌纖維比例明顯高于單純?nèi)毖M(P＜0.05)。(2)術(shù)后第2

4、8天，NGF組和VEGF組的患肢功能評(píng)分和肌肉萎縮程度明顯低于空白對(duì)照組和正常對(duì)照組;與正常對(duì)照組相比，空白對(duì)照組、NGF組和VEGF組小鼠的腓腸肌重量均出現(xiàn)不同程度的降低，但是NGF組和VEGF組的相對(duì)肌肉重量明顯高于空白對(duì)照組（P＜0.05）;NGF組和VEGF組的內(nèi)皮細(xì)胞增殖指數(shù)、毛細(xì)血管密度均明顯高于空白對(duì)照組和正常對(duì)照組(P＜0.05); NGF組的NGF和VEGF表達(dá)量明顯高于空白對(duì)照組(P＜0.05); VEGF組的VEG

5、F表達(dá)量明顯高于空白對(duì)照組(P＜0.05)，但其NGF表達(dá)量與空白對(duì)照組相比無(wú)明顯升高(P＞0.05)，與NGF組相比明顯降低(P＜0.05);NGF組和VEGF組Ⅰ型肌纖維比例明顯高于空白對(duì)照組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:(1)神經(jīng)因素在維持缺血肢體VEGF表達(dá)量和代償性血管生成，減輕組織缺血程度和維持骨骼肌纖維類型上具有重要作用。(2) NGF基因轉(zhuǎn)染能夠誘導(dǎo)缺血肢體表達(dá)NGF和VEGF蛋白，從而促進(jìn)新生血管形成，并且NGF