磁標(biāo)記自體骨髓干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死的磁共振示蹤研究.pdf

1、目的：應(yīng)用超順磁性氧化鐵顆粒標(biāo)記小型家豬骨髓干細(xì)胞，自體移植治療急性心肌梗死，應(yīng)用磁共振進(jìn)行活體成像，探討磁共振成像示蹤磁探針標(biāo)記細(xì)胞的可行性。 方法：分離培養(yǎng)小型家豬自體骨髓干細(xì)胞，采用超順磁氧化鐵顆粒對(duì)骨髓干細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，普魯士藍(lán)染色顯示細(xì)胞內(nèi)鐵，臺(tái)盼藍(lán)拒染法評(píng)估細(xì)胞活力，磁共振進(jìn)行標(biāo)記細(xì)胞的成像。將25只用于心肌梗死模型制備的豬分為實(shí)驗(yàn)組19只和對(duì)照組6只。選擇經(jīng)皮行左或右頸動(dòng)脈或股動(dòng)脈穿刺途徑，以1.5～2.0mm球囊封

2、堵左前降支下1／3，持續(xù)封堵60min后，由豬體表心電圖證實(shí)心肌梗死模型成功后，撤出球囊，結(jié)扎頸動(dòng)脈或股動(dòng)脈。經(jīng)皮冠脈內(nèi)骨髓干細(xì)胞輸注,麻醉急性心肌梗死模型豬，梗死模型建立24h后，經(jīng)皮股動(dòng)脈穿刺行冠脈造影，應(yīng)用OTW導(dǎo)管冠脈內(nèi)輸注骨髓干細(xì)胞細(xì)胞懸液，然后將盛放細(xì)胞的注射器及OTW導(dǎo)管以肝素生理鹽水沖洗注入殘余細(xì)胞，對(duì)照組經(jīng)同樣方法注入未標(biāo)記細(xì)胞。術(shù)后磁共振活體示蹤骨髓干細(xì)胞，并測(cè)量對(duì)應(yīng)序列移植標(biāo)記細(xì)胞后局部信號(hào)減低區(qū)域心肌的信噪比及移

3、植前對(duì)應(yīng)部位心肌的信噪比(SNR)，與心肌組織切片普魯士藍(lán)染色、免疫組織化學(xué)染色對(duì)照。 結(jié)果： 1、骨髓干細(xì)胞的超順磁氧化鐵顆粒標(biāo)記率在9996以上，在含超順磁氧化鐵顆粒的培養(yǎng)基中骨髓干細(xì)胞可繼續(xù)增殖，細(xì)胞活力無明顯變化。標(biāo)記細(xì)胞群成像，較未標(biāo)記細(xì)胞均有信號(hào)降低改變，以T<,2><'*> WI序列的信號(hào)強(qiáng)度變化率最大。由于細(xì)胞分裂時(shí)的稀釋作用，細(xì)胞內(nèi)的對(duì)比劑會(huì)逐漸減少。 2、實(shí)驗(yàn)組15只和對(duì)照組4只小型家豬進(jìn)入結(jié)

4、果分析，兩組各2只死于心肌梗死模型制備，實(shí)驗(yàn)組2只死于磁共振檢查前麻醉意外。19只心肌梗死模型中，13只標(biāo)記細(xì)胞移植后T<,2><'*> WI序列心肌梗死周邊見低信號(hào)區(qū)，移植后第4周信號(hào)改變明顯減弱，8周后低回聲信號(hào)均消失，離體T<,2><'*> WI序列示梗死區(qū)周邊一個(gè)呈點(diǎn)狀分布的低信號(hào)區(qū)。注入標(biāo)記細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組在注射前及注射后1周、2周、3周、4周，注射前對(duì)應(yīng)部位及局部低信號(hào)區(qū)的SNR分別為12.03±0.45，6.75±0.26，7.

5、82±0.43。9.28±0.29，11.50±0.30。與注射前比較，實(shí)驗(yàn)組注射細(xì)胞后1周、2周、3周SNR差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p值均<0.05)，信號(hào)明顯下降，4周時(shí)SNR雖仍較低，但差異已無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)照組未標(biāo)記細(xì)胞移植后與移植前比較，SNR改變差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)13只(細(xì)胞數(shù)10<'6>以上)普魯士藍(lán)細(xì)胞陽(yáng)性，對(duì)應(yīng)部位結(jié)蛋白染色陽(yáng)性、重鏈肌球蛋白染色弱陽(yáng)性，分布部位與磁共振信號(hào)減低區(qū)一致。