用于HepG2多細(xì)胞球制備的半乳糖化溫敏可逆水凝膠的研究.pdf

1、近年來(lái)半乳糖改性的細(xì)胞支架材料受到廣泛關(guān)注。半乳糖能夠與肝細(xì)胞表面的ASGPR發(fā)生特異性識(shí)別作用，可以提高肝細(xì)胞的活性，促使多細(xì)胞球的形成，并且提高細(xì)胞的功能表達(dá)情況。但是目前的研究中面臨的一個(gè)難題就是如何方便地從三維支架材料中取出多細(xì)胞球。在本課題中我們利用半乳糖改性的溫敏性細(xì)胞支架材料成功解決這一難題，制備了活性高、具有一定功能的三維肝細(xì)胞球。
　　 在本工作中我們首先合成了半乳糖改性的PNIPAM微凝膠，該凝膠同樣具有溫敏

2、性，在生理溫度下能實(shí)現(xiàn)原位凝膠化。三維細(xì)胞支架材料是由PNIPAM微凝膠和PEG組成，加入PEG是為了減緩微凝膠的收縮程度。我們用半乳糖改性的微凝膠代替部分PNIPAM，以提供不同含量的半乳糖的細(xì)胞支架。
　　 HepG2細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，細(xì)胞的活性隨半乳糖含量的增大而增大。在不含有半乳糖的支架材料中，細(xì)胞形成了比較松散的聚集體。而在一定含量半乳糖存在的情況下，細(xì)胞形成了緊密的多細(xì)胞球，并且肌動(dòng)蛋白呈現(xiàn)皮層狀分布，這表明在多細(xì)胞

3、球中存在著較強(qiáng)的細(xì)胞-細(xì)胞相互作用。在半乳糖存在的情況下，細(xì)胞的功能比如白蛋白的分泌、尿素的合成等均有所提升。在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中，NIH3T3細(xì)胞并沒(méi)有表現(xiàn)出此種現(xiàn)象，這說(shuō)明半乳糖和HepG2細(xì)胞的相互作用是特異性的，并且半乳糖確實(shí)能夠提高肝細(xì)胞的活性，促使多細(xì)胞球的形成，并且提高細(xì)胞的功能表達(dá)情況。
　　 由于材料具有溫敏性，降低溫度至室溫便可將細(xì)胞球釋放出來(lái)，此方法簡(jiǎn)單易行，對(duì)細(xì)胞以及DNA沒(méi)有損傷，經(jīng)收集的細(xì)胞球有望進(jìn)一步應(yīng)用在