蘋果多酚對UVB誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞損傷的防護(hù)與修復(fù)研究.pdf

1、國內(nèi)圖書分類號：Q946.84國際圖書分類號：547.565工學(xué)碩士學(xué)位論文蘋果多酚對UVB誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞損傷的防護(hù)與修復(fù)研究碩士研究生：崔礫礫導(dǎo)師：王振宇教授申請學(xué)位級別：工學(xué)碩士學(xué)科、專業(yè)：生物化工所在單位：理學(xué)院答辯日期：2008年6月授予學(xué)位單位：哈爾濱工業(yè)大學(xué)哈爾濱工業(yè)大學(xué)工學(xué)碩士學(xué)位論文摘要UVB是波長在280320nm的中波紫外線。隨著臭氧層的日益破壞，到達(dá)地面的紫外線越來越多，UVB對人體造成的傷害也越來越大。UVB

2、輻射可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生活性氧自由基，從而引起細(xì)胞生物學(xué)改變，導(dǎo)致基因突變、致癌和細(xì)胞死亡。蘋果是我國重要的食用水果之一，它含有大量的活性成分—蘋果多酚（Applepolyphenols）。由于蘋果具有抗氧化、清除自由基的功能所以備受學(xué)術(shù)界重視，本文在前人工作的基礎(chǔ)上開展了對蘋果多酚的提取、分離純化、細(xì)胞損傷的防護(hù)與修復(fù)試驗(yàn)等方面的研究，以期對蘋果多酚抗輻射特性進(jìn)行全面的了解，為其開發(fā)利用提供理論依據(jù)。本試驗(yàn)以國光蘋果為實(shí)驗(yàn)原料，應(yīng)用響應(yīng)面法

3、對蘋果多酚組合溶劑提取條件進(jìn)行優(yōu)化，確定出最佳的提取工藝參數(shù)。得到蘋果多酚最佳提取條件為：提取時(shí)間60.04min、提取溫度40.03℃、料液比為1：6.02(mLg)、70%乙醇與丙酮體積比為1：1.18。蘋果經(jīng)組合溶劑提取、靜止沉淀得到蘋果多酚粗品后，再經(jīng)硅膠梯度洗脫分離純化得到蘋果多酚純品，計(jì)算出蘋果多酚得率為45.42%，純度為62.5%。體外抗UVB細(xì)胞試驗(yàn)中，以HepG2細(xì)胞為靶細(xì)胞，選用MTT比色為檢測指標(biāo)，得到蘋果多酚對

4、HepG2細(xì)胞的半數(shù)抑制劑量IC50值為286.54gml，進(jìn)而研究了UVB照射劑量與細(xì)胞增殖的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)低劑量UVB促進(jìn)細(xì)胞增殖，高劑量UVB導(dǎo)致細(xì)胞死亡，并找到了UVB對細(xì)胞損傷的半致死劑量為111s。通過防護(hù)與修復(fù)試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，濃度為100gml的蘋果多酚對UVB輻射損傷有較強(qiáng)的防護(hù)作用，同時(shí)，濃度為150gml的蘋果多酚對UVB輻射損傷的修復(fù)能力最強(qiáng)。再應(yīng)用DNALadder法檢測蘋果多酚對細(xì)胞DNA損傷的防護(hù)與修復(fù)情況，瓊脂糖