蘋果多酚對UVB誘導HepG2細胞損傷的防護與修復研究.pdf

1、國內(nèi)圖書分類號：Q946.84國際圖書分類號：547.565工學碩士學位論文蘋果多酚對UVB誘導HepG2細胞損傷的防護與修復研究碩士研究生：崔礫礫導師：王振宇教授申請學位級別：工學碩士學科、專業(yè)：生物化工所在單位：理學院答辯日期：2008年6月授予學位單位：哈爾濱工業(yè)大學哈爾濱工業(yè)大學工學碩士學位論文摘要UVB是波長在280320nm的中波紫外線。隨著臭氧層的日益破壞，到達地面的紫外線越來越多，UVB對人體造成的傷害也越來越大。UVB

2、輻射可誘導機體產(chǎn)生活性氧自由基，從而引起細胞生物學改變，導致基因突變、致癌和細胞死亡。蘋果是我國重要的食用水果之一，它含有大量的活性成分—蘋果多酚（Applepolyphenols）。由于蘋果具有抗氧化、清除自由基的功能所以備受學術界重視，本文在前人工作的基礎上開展了對蘋果多酚的提取、分離純化、細胞損傷的防護與修復試驗等方面的研究，以期對蘋果多酚抗輻射特性進行全面的了解，為其開發(fā)利用提供理論依據(jù)。本試驗以國光蘋果為實驗原料，應用響應面法

3、對蘋果多酚組合溶劑提取條件進行優(yōu)化，確定出最佳的提取工藝參數(shù)。得到蘋果多酚最佳提取條件為：提取時間60.04min、提取溫度40.03℃、料液比為1：6.02(mLg)、70%乙醇與丙酮體積比為1：1.18。蘋果經(jīng)組合溶劑提取、靜止沉淀得到蘋果多酚粗品后，再經(jīng)硅膠梯度洗脫分離純化得到蘋果多酚純品，計算出蘋果多酚得率為45.42%，純度為62.5%。體外抗UVB細胞試驗中，以HepG2細胞為靶細胞，選用MTT比色為檢測指標，得到蘋果多酚對

4、HepG2細胞的半數(shù)抑制劑量IC50值為286.54gml，進而研究了UVB照射劑量與細胞增殖的關系，發(fā)現(xiàn)低劑量UVB促進細胞增殖，高劑量UVB導致細胞死亡，并找到了UVB對細胞損傷的半致死劑量為111s。通過防護與修復試驗研究發(fā)現(xiàn)，濃度為100gml的蘋果多酚對UVB輻射損傷有較強的防護作用，同時，濃度為150gml的蘋果多酚對UVB輻射損傷的修復能力最強。再應用DNALadder法檢測蘋果多酚對細胞DNA損傷的防護與修復情況，瓊脂糖