奧沙利鉑誘導(dǎo)人舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113凋亡及凋亡抑制基因Survivin表達(dá)的改變.pdf

1、目的：體外研究鉑類(lèi)抗癌藥奧沙利鉑(L-OHP)能否誘導(dǎo)人舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113凋亡以及L-OHP作用過(guò)程中凋亡抑制基因survivin表達(dá)的改變。 方法：應(yīng)用MTT法檢測(cè)L-OHP不同濃度(16、32、64、128、256μmol/L)對(duì)Tca8113細(xì)胞增殖的影響，并確定中效濃度：光鏡和電鏡形態(tài)下觀察中效濃度的L-OHP對(duì)細(xì)胞增殖的影響及凋亡形態(tài)，再用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞周期的改變，并定量測(cè)定凋亡率變化；分別應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)

2、方法和RT-PCR研究L-OHP作用于Tca8113細(xì)胞過(guò)程中凋亡抑制基因survivin表達(dá)變化。 結(jié)果：1.5種濃度的L-OHP均能夠抑制Tca8113細(xì)胞的增殖，48～72小時(shí)達(dá)到高峰；2.倒置顯微鏡下Tca8113細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了顯著變化：泡化、扭曲、固縮、脫離貼壁生長(zhǎng)；透射電鏡下中效濃度的L-OHP作用Tca8113細(xì)胞72小時(shí)后出現(xiàn)了典型的細(xì)胞凋亡形態(tài)：細(xì)胞核固縮，染色質(zhì)凝集及凋亡小體形成等；3.流式細(xì)胞儀觀察L-OH

3、P作用后Tca8113細(xì)胞周期阻滯于S期和G2/M期，48h、72h凋亡率變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，且出現(xiàn)了典型的亞二倍體峰；4.L-OHP作用Tca8113細(xì)胞24、48及72小時(shí)免疫細(xì)胞化學(xué)方法可見(jiàn)survivin不同度增強(qiáng)表達(dá)；5.L-OHP作用Tca8113細(xì)胞24、48及72小時(shí)后RT-PCR法檢測(cè)示survivinmRNA表達(dá)上調(diào)，除24h外，其余2個(gè)時(shí)相點(diǎn)加藥組、對(duì)照組的上調(diào)有顯著性差異(p<0.05)。