芹菜素聯(lián)合熱療法對(duì)舌癌Tca8113細(xì)胞抗增殖及誘導(dǎo)凋亡的影響.pdf

1、舌癌是最常見(jiàn)的口腔鱗狀細(xì)胞癌，其臨床表現(xiàn)為生長(zhǎng)快，浸潤(rùn)性強(qiáng)，惡性程度高，常發(fā)生早期頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。目前，舌癌的治療方案是以手術(shù)為主的綜合序列治療。但是如果單純手術(shù)治療并不理想，尚存在局部容易復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等難題。因此，對(duì)于舌鱗狀細(xì)胞癌，術(shù)后應(yīng)采用副作用低的化療藥物進(jìn)行聯(lián)合治療，將有助于降低復(fù)發(fā)率，提高生存率。所以，對(duì)于惡性腫瘤術(shù)后化療藥物的研究就至關(guān)重要了。
　　 芹菜素（Apigenin）是一種天然黃酮類化合物，存在于多種水果和

2、蔬菜中，具有低毒、無(wú)誘變性及高效等特點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外研究證實(shí)芹菜素可以抑制多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，如消化道腫瘤、泌尿系統(tǒng)腫瘤以及生殖系統(tǒng)腫瘤等。大量實(shí)驗(yàn)證明芹菜素在治療惡性腫瘤方面的作用日益關(guān)注。
　　 目的：
　　 1．研究芹菜素對(duì)舌癌Tca8113細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。
　　 2．探討芹菜素誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、影響細(xì)胞增殖的機(jī)制。
　　 3．研究芹菜素聯(lián)合熱療方法對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響，為芹菜素應(yīng)用于治療舌癌提供理論依

3、據(jù)。
　　 材料與方法：
　　 人工培養(yǎng)Tca8113細(xì)胞，配制不同質(zhì)量濃度的芹菜素作用于該細(xì)胞:經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后，利用倒置顯微鏡觀察Tca8113細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)及形態(tài)學(xué)變化。采用MTT法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的芹菜素對(duì)Tca8113細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用；采用AnnexinV-FITC/P1雙染色法檢測(cè)凋亡，而細(xì)胞周期進(jìn)程的變化及凋亡率則采用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS13.0軟件，采用方差分析，卡方檢驗(yàn)，卡方分割等方法

4、檢測(cè)。取a=0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1．芹菜素對(duì)Tca8113細(xì)胞有明顯的生長(zhǎng)抑制作用：Tca8113細(xì)胞在各實(shí)驗(yàn)組濃度的芹菜素通過(guò)不同時(shí)間段作用后，其生長(zhǎng)被抑制；且抑制作用的強(qiáng)度，隨著芹菜素作用濃度的增高、作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。
　　 2．倒置顯微鏡觀察：40μmol/L芹菜素處理48h后，細(xì)胞體積變小、梭形散在、細(xì)胞境界清楚，貼壁能力減弱。
　　 3．流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表明，細(xì)

5、胞在芹菜素的作用下，G1期比例逐漸增加，S期比例逐漸減少，細(xì)胞特異性停滯于G1/S期，與空白組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 4． Annexin V-FITC/PI染色法通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率：不同濃度的芹菜素如40μmol/L、80μmol/L作用于Tca8113細(xì)胞24h、48h后，細(xì)胞凋亡率明顯增加，與芹菜素與具有明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系（即芹菜素濃度越高、作用時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)胞凋亡率越高），

6、與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 5．隨著溫度和濃度的增加（43℃以內(nèi)），腫瘤細(xì)胞的凋亡率也隨之增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1．芹菜素對(duì)Tca8113細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用，其強(qiáng)度與藥物濃度和作用時(shí)間呈正相關(guān)。
　　 2．芹菜素對(duì)Tca8113細(xì)胞的凋亡具有誘導(dǎo)作用，隨著時(shí)間和劑量的增加，凋亡率也隨之增加。
　　 3．芹菜素影響Tca8113細(xì)