Surfactin對(duì)舌鱗癌Tca8113細(xì)胞株增殖、凋亡和遷移影響的研究.pdf

1、目的：
　　初步探討枯芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物Surfactin對(duì)體外培養(yǎng)的舌鱗癌Tca8113細(xì)胞株發(fā)生和發(fā)展影響。
　　方法：
　　觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)，當(dāng)細(xì)胞鋪滿瓶壁約85％-90%時(shí)，分別加入20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL濃度的藥物，培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h、48h。SRB染色法檢測Surfactin對(duì)舌鱗癌生長的影響；克隆形成實(shí)驗(yàn)，通過計(jì)數(shù)分析Surfactin對(duì)舌鱗癌細(xì)胞克

2、隆數(shù)目的影響；Hochest/PI雙染法觀察Surfactin作用于腫瘤細(xì)胞后細(xì)胞的形態(tài)的變化；流式細(xì)胞術(shù)檢測早期凋亡；Wound healing和Transwell遷移實(shí)驗(yàn)分別觀察Surfactin作用下對(duì)舌鱗癌細(xì)胞劃傷傷口的愈合能力和對(duì)細(xì)胞遷移的影響；免疫印跡法檢測與細(xì)胞遷移有關(guān)的蛋白MMPs表達(dá)的含量。
　　結(jié)果：
　　1.由SRB實(shí)驗(yàn)結(jié)果知，Surfactin能夠有效抑制舌鱗癌細(xì)胞的生長，Surfactin對(duì)腫瘤細(xì)胞

3、的抑制率隨著藥物劑量的加大也增大，24h、48h的IC50分別為74μg/mL和53μg/mL。
　　2.克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Surfactin能夠抑制舌鱗癌細(xì)胞的克隆形成。Surfactin濃度分別為25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL時(shí)，克隆聚集率分別為28.3%±0.42%、26.5%±0.71%、20.7%±0.42%，Surfactin可以明顯的減少細(xì)胞克隆的數(shù)目。
　　3. Hochest/PI雙染熒

4、光顯微鏡下觀察細(xì)胞呈高亮、核固縮等表現(xiàn)。流式細(xì)胞術(shù)檢測當(dāng)Surfactin濃度為25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL時(shí)，早期凋亡率分別為11.4%、43.45%、72.74%，與未加藥物組比較，藥物干預(yù)組細(xì)胞凋亡率顯著升高，呈現(xiàn)一定的規(guī)律性；
　　4.劃痕愈合實(shí)驗(yàn)觀察，Surfactin可明顯阻礙細(xì)胞劃傷后的傷口愈合能力；
　　5. Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出，當(dāng)藥物濃度分別為0μg/mL、25μg/