微波消融后瘤內(nèi)注射熱休克蛋白70誘導(dǎo)特異性抗肝癌免疫.pdf

1、原發(fā)性肝癌(以下簡稱肝癌)占我國惡性腫瘤死亡率第2位。目前根治性切除仍然是治療肝癌最有效的方法。但手術(shù)切除的一個突出問題是術(shù)后肝癌復(fù)發(fā)：在根治性切除后5年內(nèi)，有60％～70％的患者發(fā)生轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)。即使長徑小于5cm的小肝癌，根治性切除后5年復(fù)發(fā)率也高達(dá)40％～50％。 以微波、射頻等為能量的熱消融肝癌治療以其侵襲性小、方法簡便、費(fèi)用低廉和依從性極好等顯著優(yōu)勢已在臨床上普及。在小肝癌治療方面，微波和射頻消融已取得與根治性手術(shù)切除相似

2、的療效。與手術(shù)切除一樣，復(fù)發(fā)也是肝癌消融治療的最大難題之一。但與手術(shù)切除不同，熱消融后肝癌組織仍然留在體內(nèi)，可以期待暴露的抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤免疫。大量研究表明，消融后機(jī)體的免疫應(yīng)答增強(qiáng)，而且能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗肝癌特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。但是這種免疫應(yīng)答增強(qiáng)可能是微弱的，并沒有產(chǎn)生切實(shí)的療效，因?yàn)橄诤蟾伟┑膹?fù)發(fā)率與根治性手術(shù)切除相比并沒有明顯差別。雖然這種免疫應(yīng)答是弱的，但至少說明了兩個問題：一是熱消融可以使腫瘤抗原或腫瘤相關(guān)抗原暴

3、露；二是這些抗原能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤免疫應(yīng)答。 臨床上，為了達(dá)到確切的滅瘤效果，消融時腫瘤溫度常達(dá)60～100℃以上。在這樣的溫度條件下，組織立即發(fā)生凝固壞死，甚至出現(xiàn)氣化或炭化。另外為了保證腫瘤邊緣的細(xì)胞被殺滅，組織凝固壞死的范圍常常超過腫瘤邊緣0.5-1cm。由于腫瘤組織發(fā)生凝固性壞死，腫瘤血管也遭到破壞，熱消融后暴露的腫瘤抗原或腫瘤相關(guān)抗原因而不易被機(jī)體免疫系統(tǒng)捕獲，從而難以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤免疫應(yīng)答。這可能是臨床上熱消

4、融后機(jī)體產(chǎn)生的抗腫瘤免疫弱的原因之一。因此，探討既能有效殺滅腫瘤，消融后又能有效刺激機(jī)體抗腫瘤免疫的熱消融溫度是有臨床價值的。 熱休克蛋白(heatshockproteins，HSPs)是一組廣泛存在于生物細(xì)胞內(nèi)、進(jìn)化上高度保守的蛋白質(zhì)。其中的熱休克蛋白70(HSP70)以其能結(jié)合腫瘤抗原或腫瘤相關(guān)抗原并刺激機(jī)體產(chǎn)生獲得性免疫、刺激機(jī)體產(chǎn)生天然免疫、具有促炎癥因子的作用等多重特性，在腫瘤免疫治療研究中受到重視。微波消融后瘤內(nèi)注射

5、HSP70有望促進(jìn)消融后腫瘤抗原被機(jī)體免疫系統(tǒng)利用，進(jìn)一步增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答強(qiáng)度，達(dá)到延緩腫瘤生長或防止熱消融后肝癌復(fù)發(fā)的目的。 本研究通過建立小鼠皮下移植性肝癌微波消融模型，探討不同消融溫度對小鼠腫瘤HSP70表達(dá)和機(jī)體細(xì)胞免疫的影響。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步觀察不同溫度微波消融后瘤內(nèi)注射HSP70對小鼠抗腫瘤免疫的影響以及對再次接種腫瘤生長的影響，探索一種能增強(qiáng)肝癌熱消融后機(jī)體抗腫瘤免疫的方法，達(dá)到延緩或抑制肝癌生長或復(fù)發(fā)的目