特異性人免疫球蛋白分離純化方法研究.pdf

1、論文對乙肝人免疫球蛋白（HHBIG）和狂犬人免疫球蛋白（HRIG）兩種特異性免疫球蛋白的分離純化方法進(jìn)行了研究，針對親和3號配基這樣的生物大分子物質(zhì)制備親和介質(zhì)所遇到的配基密度低的難題進(jìn)行了探索。主要工作如下： （1）通過對HHBIG原料進(jìn)行物性分析，確定采用親和層析方法進(jìn)行HHBIG的純化。以瓊脂糖凝膠為基質(zhì)制備了用于純化乙肝免疫球蛋白的親和層析介質(zhì)Sepharose4FF-HHBIG，并優(yōu)化了HHBIG親和層析的操作條件。對

2、效價(jià)為95 IU/mL的HHBIG原料，純化倍數(shù)達(dá)到30左右，活性收率達(dá)到45%以上；對效價(jià)為45 IU/mL的HHBIG原料，純化倍數(shù)達(dá)到40左右，活性收率達(dá)到50%以上。通過在HHBIG親和層析單元操作中加入2% PEG D作為純化伴侶保護(hù)HHBIG的活性，使得HHBIG的活性回收率提高10-15%。 （2）以瓊脂糖凝膠為基質(zhì)制備了用于純化狂犬免疫球蛋白的親和層析介質(zhì)Sepharose4FF-HRIG，并對親和層析條件進(jìn)行了

3、優(yōu)化，對狂犬免疫球蛋白的純化倍數(shù)在15左右，活性收率達(dá)到18%。 （3）以改性PS大孔微球制備了用于純化狂犬免疫球蛋白的新型親和介質(zhì)mPS-HRIG，并將mPS-HRIG和Sepharose4FF-HRIG親和介質(zhì)的理化性能和層析效果進(jìn)行了比較。新型mPS-HRIG親和介質(zhì)的配基密度約為Sepharose4FF-HRIG親和介質(zhì)的兩倍，mPS-HRIG親和介質(zhì)分離純化的活性回收率和純化倍數(shù)高于Sepharose4FF-HRIG親