當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)急性缺血再灌注大鼠視網(wǎng)膜中腦紅蛋白的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、腦紅蛋白(neuroglobin,NGB)是一種主要位于腦內(nèi)神經(jīng)元的攜氧球蛋白,在氧的攝取、運(yùn)輸和利用等過(guò)程中起著極其重要的作用,可作為一種內(nèi)源性神經(jīng)保護(hù)因子保護(hù)神經(jīng)元免受缺血性損害。視網(wǎng)膜是人體中耗氧量最高的組織之一,近年來(lái)腦紅蛋白與眼缺血性疾病之間的關(guān)系越來(lái)越受到醫(yī)學(xué)工作者的重視。 本課題立足于NGB在視網(wǎng)膜中的高表達(dá)與視網(wǎng)膜缺氧之間一定存在著密切的特殊關(guān)系這個(gè)假說(shuō),參照當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)缺血缺氧病變的治療作用,以視網(wǎng)膜內(nèi)NGBm

2、RNA的表達(dá)作為研究核心,建立視網(wǎng)膜缺血缺氧的動(dòng)物模型,目的首先是證實(shí)病理狀況下NGB在視網(wǎng)膜中的表達(dá)變化,進(jìn)一步說(shuō)明NGB與視網(wǎng)膜缺血缺氧之間的關(guān)系,并在此基礎(chǔ)上探討當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)視網(wǎng)膜缺血缺氧可能的防治作用。 目的:1.建立大鼠急性視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的模型,證實(shí)病理狀況下腦紅蛋白mRNA在視網(wǎng)膜中的表達(dá)變化,探討腦紅蛋白與視網(wǎng)膜缺血缺氧之間的關(guān)系。 2.探討當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)急性視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的預(yù)防作用,進(jìn)一步探討中

3、藥對(duì)視網(wǎng)膜循環(huán)障礙性疾病的預(yù)防作用。 材料與方法:本課題使用成年SD大鼠(體重為200g±10g),麻醉后分離眼外肌充分暴露視神經(jīng)髓鞘,剪開鞘膜分離視神經(jīng),距視神經(jīng)乳頭約1.5mm處用自制的可調(diào)控自閉式微血管鉗不全夾閉中央動(dòng)靜脈5min,造成急性視網(wǎng)膜缺血缺氧,而后松開血管鉗使視網(wǎng)膜再灌流。全部72只大鼠隨機(jī)分成3個(gè)大組(模型組、中藥組、西比靈組),12個(gè)小組(每個(gè)大組按照造模后取材時(shí)間的不同再分成4個(gè)小組),另設(shè)空白對(duì)照組(正

4、常組)及假手術(shù)組,每組6只動(dòng)物。利用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)對(duì)大鼠視網(wǎng)膜中腦紅蛋白mRNA表達(dá)進(jìn)行測(cè)定。所得數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,用SPSS11.5軟件中的單因素方差分析進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。 結(jié)果:1.中藥組大鼠體重(306.00g±20.69g)明顯增加,與其他幾組差異有顯著性(P<0.01); 2.模型組中0min、5min及15min取材組A值(腦紅蛋白/內(nèi)參GAPDH相對(duì)光吸收度比值)急劇升高(分別為1.43

5、733±0.288874、1.24350±0.258606、1.12233±0.247122),與正常組(0.50750±0.036594)間差異非常顯著(P<0.01),30min取材組(0.57867±0.108286)與正常組間差異無(wú)顯著性(P>0.05),提示在急性視網(wǎng)膜缺血再灌注早期腦紅蛋白表達(dá)急劇升高。 3.中藥組中0min(0.88433±0.191541)、5min(0.78933±0.088065)、15min

6、取材組(0.56217±0.077295)與模型組相應(yīng)小組間差異非常顯著(P<0.01),A值較模型組低,提示中藥當(dāng)歸補(bǔ)血湯在急性缺血再灌注損傷早期具有保護(hù)視網(wǎng)膜的作用;30min取材組(0.52083±0.043009)與相應(yīng)模型組之間差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 4.中藥組中0min、5min取材組與正常組間的差異非常顯著(P<0.01),A值較正常組高,15min、30min取材組與正常組間差異無(wú)顯著性,提示中藥當(dāng)歸補(bǔ)血

7、湯促進(jìn)腦紅蛋白表達(dá)恢復(fù)。 5.西比靈組與模型組之間差異均無(wú)顯著性(P>0.05),提示西比靈膠囊對(duì)急性視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷腦紅蛋白表達(dá)無(wú)影響。 6.正常組與假手術(shù)組間A值差異無(wú)顯著性(P>0.05),提示手術(shù)創(chuàng)傷對(duì)腦紅蛋白表達(dá)無(wú)影響。 結(jié)論:1.采用可調(diào)控式微血管鉗夾閉中央動(dòng)靜脈進(jìn)行造模是成功的,單純手術(shù)創(chuàng)傷對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)明顯影響。 2.在急性視網(wǎng)膜缺血再灌注早期腦紅蛋白表達(dá)急劇升高,提示腦紅蛋白與急性缺血

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