環(huán)氧合酶2選擇性抑制劑塞來(lái)昔布對(duì)胰腺癌化療和放療的增敏作用及其機(jī)制.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文環(huán)氧合酶2選擇性抑制劑塞來(lái)昔布對(duì)胰腺癌化療和放療的增敏作用及其機(jī)制姓名：徐剛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化）指導(dǎo)教師：王興鵬靖大道20050427li太學(xué)博士研競(jìng)生曲文環(huán)氕夸●2譴鐸攔掙刪利塞采鼉希對(duì)蕞|穗化磚和t本辭增t雄船A茸機(jī)制昔布能明顯增加體外培養(yǎng)的胰腺癌細(xì)胞和移植瘤組織的腫瘤細(xì)胞凋亡；促凋亡基因bax表達(dá)上調(diào)，抗凋亡基因bcl2的表達(dá)下調(diào)。3流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)提示，塞來(lái)昔布可誘導(dǎo)SWl990細(xì)胞阻滯于Go

2、／GI期，塞來(lái)昔布和吉西他濱聯(lián)合應(yīng)用細(xì)胞周期阻滯作用更為明顯。Westem印跡法檢測(cè)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)，其表達(dá)變化與周期分布的改變相一致。4胰腺癌細(xì)胞體外血管生成分析、雞胚尿囊膜血管生成模型和裸鼠移植瘤組織MVD檢測(cè)均表明，塞來(lái)昔布可抑制胰腺癌新生血管形成，與吉西他濱聯(lián)合后，抑制血管生成作用無(wú)明顯增強(qiáng)。細(xì)胞體外侵襲力測(cè)定和雞胚尿囊膜移植瘤侵襲模型均提示。塞來(lái)昔布可降低胰腺癌細(xì)胞侵襲力，塞來(lái)昔布與吉西他濱聯(lián)合，對(duì)胰腺癌細(xì)胞侵襲力的抑制作

3、用無(wú)明顯增加。RTPCR、明膠酶譜和反式明膠酶譜分析表明，塞來(lái)昔布抑制胰腺癌細(xì)胞分泌和激活MMP一2和MMP9，但對(duì)TIMP一1和TIMP2的分泌和激活無(wú)明顯影響，聯(lián)合吉西他濱前后，MMP，2、MMP9、TIMP1和TIMP2的分泌和活性無(wú)明顯改變。主要結(jié)論及意義：COX一2選擇性抑制劑塞來(lái)昔布對(duì)吉西他濱治療胰腺癌有增敏作用，其機(jī)制涉及細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)和細(xì)胞周期阻滯，與腫瘤新生血管生成受抑制和腫瘤細(xì)胞侵襲力的降低關(guān)系并不密切。第二部分環(huán)氧

4、合酶2選擇性抑制劑塞來(lái)昔布對(duì)胰腺癌放療增敏作用及機(jī)制研究研究目的：研究環(huán)氧合酶2(cyctooxygenase一2，COX一2)選擇性抑制剎塞來(lái)昔布聯(lián)合放射治療對(duì)胰腺癌的作用，并從細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期改變、腫瘤新生血管形成和細(xì)胞侵襲力等方面探討塞來(lái)昔布的作用機(jī)制。旨在闡明COX2選擇性抑制劑對(duì)胰腺癌放療的增敏作用及其可能機(jī)制。研究方法：1克隆形成實(shí)驗(yàn)(平板法)檢測(cè)COX2選擇性抑制劑塞來(lái)昔布、放療及其聯(lián)合作川對(duì)胰腺癌細(xì)胞系SWl990細(xì)胞

5、增殖的抑制作用。建立SWl990細(xì)胞裸鼠移植瘸模型，分別給予塞來(lái)昔布、放療或兩者聯(lián)合干預(yù)。免疫組化染色研究裸鼠移植瘤組織中增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)。Western印跡法檢測(cè)SWI990細(xì)胞PCNA蛋白表達(dá)。2原位缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)研究胰腺癌細(xì)胞凋亡，RTPCR檢測(cè)bcl2凋亡相關(guān)基因的表達(dá)。3體外血管生成測(cè)定和體外侵襲力測(cè)定方法鹼測(cè)胰腺癌細(xì)胞新生血管生成情況和細(xì)胞侵襲力的改變，免疫組化染色標(biāo)記裸鼠杉拉瘤新生血管壁IV型膠