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1、目的:采用清醒自由活動(dòng)大鼠血流動(dòng)力學(xué)監(jiān)測(cè)技術(shù),觀(guān)察大鼠在頸淋巴引流阻滯(CLB)和頂核毀損后頸淋巴引流阻滯不同時(shí)間的血壓水平,并進(jìn)行比較,探討CLB和頂核毀損后CLB動(dòng)物血壓變化的時(shí)間趨勢(shì)并通過(guò)檢測(cè)大鼠不同時(shí)間壓力反射敏感性、血壓波動(dòng)性以及心率變異性等指標(biāo),探討小腦頂核在CLB后頂核在血壓調(diào)節(jié)功能改變中的作用。并觀(guān)察了CLB后頂核(FN)組織形態(tài)以及主要遞質(zhì)等方面的變化,以探討CLB對(duì)大鼠頂核的影響,初步分析CLB后頂核對(duì)大鼠血壓影響的
2、中樞機(jī)制。 方法:采用雄性健康Sprague-Dawley大鼠,隨機(jī)分為CLB假手術(shù)組(CLBSham組)、CLB組和頂核假毀損加CLB假手術(shù)組、項(xiàng)核毀損加CLB組四組。應(yīng)用MPA2000生物信號(hào)記錄系統(tǒng),分別記錄兩組大鼠在假手術(shù)和術(shù)前及術(shù)后第1、3、5、7、9天收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、心率(HR)的變化。血壓記錄過(guò)程中測(cè)定四組大鼠術(shù)前、術(shù)后第1、3、5、7、9天壓力感受性反射敏感性(BRS)。然后脫機(jī)分析兩組大鼠術(shù)
3、前及術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)的收縮壓波動(dòng)性(SBPV)、舒張壓波動(dòng)性(DBPV)以及心率變異性(HRV),進(jìn)行血壓調(diào)節(jié)功能的評(píng)價(jià)。其中CLB假手術(shù)組(CLB Sham組)和CLB組分別于CLB術(shù)前、術(shù)后第1、3、5、7、9天各取5只用4%多聚甲醛磷酸緩沖液經(jīng)心灌注固定,取頂核作冰凍切片、HE染色光鏡觀(guān)察及谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)免疫組織化學(xué)染色光鏡觀(guān)察;相同時(shí)間點(diǎn)各取3只用2.5%戊二醛磷酸緩沖液經(jīng)心灌注固定,用電子顯微鏡觀(guān)察頂核
4、超微結(jié)構(gòu)的變化,以確定大鼠CLB后頂核的組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)改變,從而初步闡明頂核在CLB后血壓調(diào)節(jié)改變中的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。 結(jié)果:CLB術(shù)后第1天SBP、DBP、MAP、HR及BRS開(kāi)始下降,第7天降至最低,BRS在7天后無(wú)明顯恢復(fù),而血壓及心率隨著CLB時(shí)間的延長(zhǎng)呈先下降后上升趨勢(shì)。相反,HRV、BPV則在CLB術(shù)后第1天出現(xiàn)升高,第7天升至最高點(diǎn),后逐漸下降。頂核毀損后頸淋巴引流阻滯導(dǎo)致各指標(biāo)變化趨勢(shì)與單純頸淋巴引流阻滯組基本一致。與
5、單純頸淋巴引流阻滯組比較,SBP、DBP、MAP和HR于術(shù)后第5天開(kāi)始下降幅度明顯增大,第7天降至最低,第9天有所恢復(fù),但低于單純頸淋巴引流阻滯組水平。BRS在術(shù)后第5天降至最低,明顯低于單純頸淋巴引流阻滯組水平,后無(wú)明顯恢復(fù)。HRV、BPV于術(shù)后第5天開(kāi)始上升幅度明顯增大,第7天達(dá)最高,第9天有所恢復(fù),但高于單純頸淋巴引流阻滯組水平。組織病理學(xué)觀(guān)察發(fā)現(xiàn),頸淋巴引流阻滯術(shù)后1天,可見(jiàn)頂核部分神經(jīng)細(xì)胞腫大,呈圓形,核增大或融解,胞漿淡染,
6、胞膜與周?chē)纸缑黠@;術(shù)后7天,可見(jiàn)大量神經(jīng)元皺縮,核固縮、深染,呈三角形、長(zhǎng)條形或不規(guī)則形,染色質(zhì)聚集呈團(tuán)塊狀,核仁不清;胞漿淡染。術(shù)后9天可見(jiàn)細(xì)胞密度減小,體積縮小,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡,核固縮,核仁偏位或消失等變化。免疫組化觀(guān)察發(fā)現(xiàn)CLB后1天Glu免疫組化陽(yáng)性染色細(xì)胞增多,隨術(shù)后天數(shù)增加,呈逐漸增多趨勢(shì),且染色強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)。CLB后1天GABA免疫組化陽(yáng)性染色細(xì)胞即見(jiàn)減少,隨術(shù)后天數(shù)增加,呈逐漸減少趨勢(shì),且染色強(qiáng)度逐漸減弱。超微結(jié)構(gòu)觀(guān)察
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