轉(zhuǎn)化生長因子β1及白介素1β對(duì)終板軟骨細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforminggrowthfactorbetat1，TGF-β1）及白介素1β（interleukin1betat，IL-1β）對(duì)人軟骨終板組織和體外培養(yǎng)兔終板軟骨細(xì)胞的作用研究。初步探討TGF-β1及IL-1β對(duì)椎間盤退變的發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制，為預(yù)防和治療椎間盤退變的防治提供新思路。
　　方法：
　　1.①采用免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry,IHC）方法檢測

2、我院2009年11月—2010年6月中病變組取自頸椎病行前路手術(shù)切除的椎體軟骨終板20例；對(duì)照組取自頸椎骨折前路手術(shù)治療所取得椎體軟骨終板20例中TGF-β1及IL-1β的表達(dá)。②采用蛋白免疫印跡（westernblot）方法檢測病變組及對(duì)照組中TGF-β1及IL-1β的表達(dá)。
　　2.采用兔終板軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)，觀察細(xì)胞形態(tài)，繪制生長曲線，選擇2-4代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。在無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞分別加入不同濃度的TGF-β1及IL

3、-1β（0.5pg/ml、5pg/ml、10pg/ml、50pg/ml），繼續(xù)分別培養(yǎng)24h后，四甲基偶氮哇鹽（4-methylthiazolyltetrazoliumMTT）比色法測定TGF-β1及IL-1β對(duì)細(xì)胞增殖的情況。
　　結(jié)果：
　　1.①免疫組化中病變組TGF-β1及IL-1β的陽性率分別為32.9076％、51.5207%，對(duì)照組中TGF-β1及IL-1β的陽性率分別為42.4816%、33.9185%。TG

4、F-β1在對(duì)照組總的陽性表達(dá)明顯高于病變組中的表達(dá)，IL-1β在病變組中陽性表達(dá)明顯高于對(duì)照組的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。②蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組TGF-β1的表達(dá)明顯高于病變組，病變組IL-1β的表達(dá)明顯高于對(duì)照組。
　　2..MTT法顯示TGF-β1實(shí)驗(yàn)組濃度為0.5pg/ml、5pg/ml、10pg/ml時(shí)，對(duì)軟骨細(xì)胞均有明顯的促增殖作用，50pg/ml時(shí)對(duì)軟骨細(xì)胞有抑制增殖作用。各實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組比較差異

5、具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且作用強(qiáng)度呈濃度依賴性TGF-β1濃度為10pg/ml作用軟骨細(xì)胞24h時(shí)，促增生效果最大（P<0.01）;IL-1β實(shí)驗(yàn)組濃度為0.5pg/ml、5pg/ml、10pg/ml、50pg/ml時(shí)，對(duì)軟骨細(xì)胞均有明顯的抑制增殖作用。
　　結(jié)論：
　　1.人退變終板軟骨組織中存在TGF-β1及IL-1β的表達(dá)，且病變組中TGF-β1低于對(duì)照組，IL-1β的表達(dá)高于對(duì)照組，TGF-β1及IL-1β陽