環(huán)磷酰胺原料藥中有關物質的分析方法.pdf

1、在現代制藥業(yè)、藥物開發(fā)和制造中，原料的制備、產品的合成和保存等過程中均會不同程度地帶入一些雜質。由于雜質和副產物對人體有潛在毒性，因此準確地鑒定微量雜質和副產物極其重要。各國藥典也對于藥物及其關鍵中間體的純度都有嚴格要求。
　　環(huán)磷酰胺是臨床常用的烷化劑類免疫抑制劑，主要用于腫瘤免疫，對多種腫瘤有明顯的抑制作用。環(huán)磷酰胺原料藥在生產和貯存過程中會產生多種雜質，參考美國藥典要求，應采用有效的分析方法進行檢測。其中降解產物A—二（2-

2、氯乙基）胺鹽酸鹽具有高毒性，利用美國藥典(USP)推薦的有關物質分析法較難檢出。本研究采用薄層色譜、高效液相色譜和離子交換色譜分離方法系統(tǒng)對環(huán)磷酰胺原料藥的有關物質，進行了分離檢測，建立了環(huán)磷酰胺的有關物質分析方法。主要結論如下:
　　1.利用薄層色譜法(USP)在專屬性實驗考察了雜質1在限度濃度下及環(huán)磷酰胺降解產物A在不同濃度下的檢測，因在薄層板上均未出現清晰的斑點，而標準樣品溶液具有清晰的斑點，說明在本實驗條件下USP推薦的薄

3、層色譜法并不適用于雜質1及降解產物A的檢測。在檢測限試驗中，降解產物B-D的檢測限均為0.03％，小于0.06％的雜質限度，靈敏度高。而是適合環(huán)磷酰胺降解產物B-D的限度檢測的分析方法。
　　2.建立了環(huán)磷酰胺中降解產物B及雜質1的HPLC-UV定量檢測方法:大連依利特柱Hypersil ODS-2(250 mm×4.6 mm，5μm)，水和乙腈(77/23)混合液為流動相，流速為1.0 ml/min;柱溫:25℃;檢測波長為19

4、5 nm;進樣量20μL。雜質1與降解產物B在1.75～47.43μg/ml濃度范圍內線性關系良好(R＞0.996，n=6)，準確度實驗的回收率在94～110％范圍，精密度相對標準偏差不超過5.0％，該方法的檢測限最低可達0.08μg/ml。
　　3.建立了環(huán)磷酰胺中降解產物A的離子交換色譜-TCD定量檢測方法:采用色譜柱lonPac CS12A（250 mm×4.0 mm Analytical），以甲烷磺酸為流動相，流速為1.0