Apelin對大鼠離體肺動脈環(huán)的舒張作用及其機(jī)制.pdf

1、目的： 探討新的小分子活性肽Apelin對大鼠離體肺動脈環(huán)的舒張作用及其機(jī)制，以了解Apelin對肺血管的調(diào)節(jié)作用。 方法： 采用離體肺血管環(huán)灌流法測定血管環(huán)張力的變化。分離出大鼠肺動脈環(huán)，剔除周圍結(jié)締組織后切成3～4mm動脈環(huán)，垂直懸掛在含5ml K-H液的PanLab離體組織浴槽中，血管環(huán)張力變化通過張力換能器放大后用PowerLab多通道生理記錄儀記錄。實(shí)驗(yàn)分兩大部分： 1.Apelin對正常大鼠離

2、體肺動脈環(huán)的舒張作用及其機(jī)制： ①觀察累積濃度Apelin(0.01～100nmol/L)對去甲腎上腺素(NE)預(yù)先收縮的內(nèi)皮完整肺動脈血管環(huán)(肺主動脈、左、右肺動脈環(huán))的直接作用；②觀察累積濃度Apelin(0.01～100nmol/L)對NE預(yù)先收縮的去內(nèi)皮后血管環(huán)的直接作用。③分別以一氧化氮合酶(NOS)抑制劑L-NAME、鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑ODQ、環(huán)氧合酶抑制劑吲哚美辛(indomethacin)、ATP敏感性鉀通道(K

3、ATP)阻斷劑格列本脲(glibenclamide)孵育內(nèi)皮完整的肺動脈血管環(huán)后，以NE預(yù)先收縮，觀察累積濃度Apelin(0.01～100nmol/L)的血管舒張效應(yīng)的變化。 2.Apelin對慢性低氧性肺動脈高壓大鼠離體肺動脈環(huán)的舒張效應(yīng)及機(jī)制： 慢性低氧組大鼠置于低氧飼養(yǎng)艙內(nèi)，充入N2使O2濃度維持在9～11％，CO2濃度<3％，每天8小時，每周6天，連續(xù)4周；常氧對照組在常壓常氧下飼養(yǎng)。動物飼養(yǎng)到四周后，用戊巴比

4、妥鈉(35mg·kg-1)腹腔麻醉，采用右心導(dǎo)管法測量mPAP，頸總動脈插管測量平均頸動脈壓(mCAP)，剖胸分離出心肺，分別稱取右心室游離壁(RV)和左心室+室間隔重量(LV+S)，計(jì)算Herman-Willson指數(shù)=[RV/(LV+S)]。以mPAP、RV/LV+S及mCAP作為慢性肺動脈高壓、右心室肥厚的模型指標(biāo)。模型復(fù)制成功后同組大鼠進(jìn)行以下離體肺動脈環(huán)實(shí)驗(yàn)：①觀察Apelin對低氧大鼠的肺動脈環(huán)的舒張效應(yīng)。②L-NAME孵育

5、后，觀察Apelin對低氧大鼠肺動脈的舒張效應(yīng)的變化。 結(jié)果： 1.Apelin對正常大鼠離體肺動脈環(huán)的舒張作用及其機(jī)制 Apelin(0.01～100nmol/L)對NE預(yù)先收縮的內(nèi)皮完整的肺動脈環(huán)具有濃度依賴性的舒張效應(yīng)。而去除內(nèi)皮后，Apelin(0.01～100nmol/L)對肺主動脈環(huán)濃度依賴性的舒張效應(yīng)明顯減弱。在內(nèi)皮完整的肺主動脈環(huán)，L-NAME(10μmol/L)或ODQ(10μmol/L)預(yù)孵

6、育后，Apelin對NE預(yù)先收縮的肺血管舒張效應(yīng)均明顯減弱。環(huán)氧合酶抑制劑indomethacin預(yù)孵育后，Apelin舒張NE預(yù)先收縮的肺血管的舒張效應(yīng)較孵育前無顯著性差異(P>0.05)。預(yù)先用KATP阻斷劑格列本脲(glibenclamide，1μmol/L)孵育后，Apelin的舒張效應(yīng)降低，在100nmol/L時，其舒張效應(yīng)降低55.13％(P<0.01)。Apelin對肺主動脈、左、右肺動脈的舒張效應(yīng)無顯著性差異(P>0.0

7、5)。 2.Apelin對低氧性肺動脈高壓大鼠離體肺動脈環(huán)的舒張效應(yīng)及機(jī)制 與常氧對照組比較：低氧組大鼠mPAP比常氧對照組高40.07％(P<0.01)，RV/(LV+S)高32.00％(P<0.01)，mCAP無顯著性差異(P>0.05)，提示慢性低氧性肺動脈高壓和右心室肥厚模型建立成功。慢性低氧組大鼠的肺主動脈環(huán)對Apelin的舒張反應(yīng)較常氧對照組大鼠明顯降低，在最大濃度100nmol/L時，Apelin的效應(yīng)低6

8、0.45％(P<0.01)。L-NAME預(yù)孵育后，Apelin對常氧對照組和低氧組大鼠的肺主動脈環(huán)的舒張效應(yīng)較相應(yīng)的沒有用L-NAME預(yù)孵育的同類型血管明顯降低(P<0.01)，且常氧對照組大鼠較低氧組減少明顯。 結(jié)論： 1.Apelin對大鼠離體肺動脈環(huán)具有濃度依賴性的舒張作用； 2.Apelin對肺主動脈環(huán)的舒張效應(yīng)為內(nèi)皮依賴性； 3.Apelin對肺主動脈環(huán)的舒張效應(yīng)與NO-sGC-cGMP信號途徑