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1、目的:探討丙泊酚對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用及其機(jī)制。
方法:1.將制備的SD大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)隨機(jī)分為內(nèi)皮完整組(n=36)和去內(nèi)皮組(棉簽去內(nèi)皮)(n=30)。每組分別包括:①1×10-6mol/L去甲腎上腺素(NA)處理組(n=6);②1×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組(n=6);③1×10-6mol/L NA+0.18%脂肪乳劑(相當(dāng)于1×10-4mol/L丙泊酚中所含脂肪乳的量)處理組(n=6)和1×10-
2、6mol/LNA+1×10-4mol/L丙泊酚處理組(n=6);④1×10-4mol/L L-NAME+1×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組(n=6)(去內(nèi)皮組無(wú)此組);⑤1×10-5mol/L Gliben+1×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組(n=6)。1×10-6mol/LNA誘導(dǎo)收縮大鼠血管環(huán)達(dá)峰值后,每15min加遞增濃度(1×10-6mol/L、5×10-6mol/L、1×10-5mol/L、5×10-5mol/
3、L、1×10-4mol/L)的丙泊酚,觀察血管張力的變化確定丙泊酚的血管舒張效應(yīng)和血管內(nèi)皮的關(guān)系。2.將制備的SD大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)隨機(jī)分為內(nèi)皮完整組(n=36)和去內(nèi)皮組(棉簽去內(nèi)皮)(n=36),每組各分6個(gè)亞組:①10nmol/L Go6976+1×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組(n=6);②10μmol/L Rottlerin+1×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組(n=6);③2μmol/LPKCε-Pseudo+1×
4、10-6mol/L NA+丙泊酚處理組(n=6);④2μmol/LPKCθ-Pseudo+l×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組(n=6);⑤2μmol/LPKCζ-Pseudo+1×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組(n=6);⑥對(duì)照組:1×10-6mol/LNA+丙泊酚處理組(n=6)。PKCα抑制劑Go6976、PKCδ抑制劑Rottlerin、PKCζ、θ和ε的假底物孵育血管環(huán)30min后,加1×10-6mol/L NA
5、收縮血管環(huán)達(dá)峰值,每15min加遞增濃度的丙泊酚(1×10-6mol/L、5×10-6mol/L、10-5mol/L、5×10-5mol/L、10-4mol/L),觀察血管張力的變化確定PKC不同亞型是否介導(dǎo)丙泊酚引起的血管舒張。
結(jié)果:1.丙泊酚引起的血管舒張幅度呈濃度依賴性,在內(nèi)皮完整組更明顯,舒張幅度分別為(11.28±1.51)%、(25.23±4.03)%、(44.08±4.49)%、(66.28±4.83)%及
6、(74.59±4.78)%,與相同濃度藥物處理的去內(nèi)皮組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。內(nèi)皮完整組,一氧化氮合成酶抑制劑L-NAME(1×10-4mol/L)預(yù)處理明顯降低丙泊酚的血管舒張效應(yīng),與1×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組相比差異顯著(p<0.01)。另外,特異性KATP通道抑制劑Gliben預(yù)處理血管環(huán)也明顯抑制丙泊酚內(nèi)皮依賴性的血管舒張幅度(p<0.05,與1×10-6mol/L NA+丙泊酚處理組相比),且使
7、低濃度(1×10-6mol/L、5×10-6mol/L)丙泊酚的血管舒張效應(yīng)轉(zhuǎn)為收縮,與基礎(chǔ)值相比,差異顯著。2.在內(nèi)皮完整組,G06976、PKCε假底物和PKCθ假底物分別減小丙泊酚引起的血管舒張幅度,與內(nèi)皮完整的對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);PKCδ抑制劑Rottlerin完全抑制丙泊酚的血管舒張效應(yīng),且使1×10-6mol/L和1×10-5mol/L丙泊酚的血管舒張效應(yīng)翻轉(zhuǎn)為收縮,與基礎(chǔ)值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<
8、0.05)。在去內(nèi)皮組,抑制上述各PKCs亞型能增強(qiáng)丙泊酚的血管舒張效應(yīng):Rottlerin,PKCε假底物和PKCθ假底物處理,分別使丙泊酚(1×10-6mol/L、5×10-6mol/L、1×10-5mol/L、5×10-5mol/L、1×10-4mol/L)的血管舒張幅度明顯增加,與去內(nèi)皮對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);G06976和PKCζ假底物處理,分別使1×10-5mol/L和l×10-4mol/L濃度范圍的丙泊
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