Apelin-13對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用及機制.pdf

1、目的：探討新近發(fā)現(xiàn)的小分子活性肽Apelin對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用，以及研究Apelin舒張血管的細胞信號轉導通路機制，另外再探討Apelin對腎性高血壓模型大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用的意義。 方法：①清潔級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠27只，體重150～180g，隨機分為對照組和兩腎一夾(2K1C)高血壓大鼠模型組。飼養(yǎng)8周后，戊巴比妥鈉(35mg/kg，i.p.)麻醉，測定平均頸動脈壓(mCAP)，

2、同時測定左心重(左心室加室間隔)與體重比值(LVM/BW及右腎與左腎比值(RK/LK)。②血管環(huán)制備:左頸總動脈插管放血處死動物，迅速取出胸主動脈，置于通以95％O2+5％CO2混合氣體的K-H液中，小心去除周圍結締組織后將血管剪成約3～4mm寬的血管環(huán)。③采用累計加藥法，檢測Apelin-13對去甲腎上腺素(Norepinephrine，NE)預收縮內(nèi)皮完整的胸主動脈環(huán)及去內(nèi)皮后的胸主動脈環(huán)張力的變化；及分別觀察用L-N-硝基精氨酸甲

3、酯(L-N(G)-nitroargininemethylester，L-NAME)和尼群地平(Nitrendipine)孵育后，Apelin-13對去甲腎上腺素(NE)預收縮的胸主動脈環(huán)張力的變化。 結果：①與對照組相比：模型組mCAP高50.38％(P＜0.01)，LVM/BW高32.11％(P＜0.01)，RK/LK高51.02％。②Apelin-13對大鼠離體肺主動脈環(huán)有舒張效應，Apelin-13呈濃度依賴性舒張對照組及

4、模型組的離體主動脈環(huán)。③NO合酶抑制劑L-NAME減弱了Apelin-13對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用。大鼠離體胸主動脈環(huán)在反復洗去前面藥物待血管環(huán)張力回至基線后，用L-NAME(10μmol·L-1)孵育30分鐘，然后再加入10-11～10-7mol·L-1濃度Apelin-13，血管環(huán)舒張幅度降低，與不預先用L-NAME孵育相比，Emax(舒張血管最大效應，即舒張效能，反應血管活性物質(zhì)收縮血管的內(nèi)在活性)顯著降低，對照組Emax降

5、低30.12％(P＜0.05)，模型組Emax降低38.35％(P＜0.01)；EC50(半數(shù)有效濃度，與血管活性物質(zhì)對血管的親和力大小相關，反應藥物效價強度，取負對數(shù)值)與未用L-NAME孵育相比顯著增高：對照組增加870.9％(P＜0.01)，模型組增加86.35％(P＜0.05)。④Apelin-13舒張2K1C高血壓模型大鼠離體胸主動脈環(huán)效應增強(P＜0.05)。⑤Ca2+通道阻滯劑Nitrendipine能夠減弱Apelin-

6、13對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用。用Nitrendipine孵育30分鐘，然后再加入各種濃度Apelin-13，血管環(huán)舒張幅度降低，與不預先用Nitrendipine孵育相比，Emax顯著降低，對照組Emax降低28.38％(P＜0.05)，模型組Emax降低33.48％(P＜0.01)；EC50與未用Nitrendipine孵育相比顯著增高：對照組增加370.45％(P＜0.01)，模型組增加455.45％(P＜0.01)。⑥Ape

7、lin-13對大鼠離體胸主動脈環(huán)去內(nèi)皮后的舒張作用顯著減弱。大鼠離體胸主動脈環(huán)去內(nèi)皮后再加入10-11～10-7mol·L-1濃度Apelin-13，血管環(huán)舒張幅度降低，與內(nèi)皮完整的大鼠離體胸主動脈環(huán)相比，Emax顯著降低：對照組Emax降低42.29％(P＜0.05)，模型組Emax降低38.07％(P＜0.01)；EC50顯著增高：對照組增加370.45％(P＜0.05)，模型組增加248.63％(P＜0.05)。 結論：(

8、1)Apelin-13是大鼠離體胸主動脈環(huán)的有效血管舒張劑。(2)NO合酶抑制劑降低Apelin-13對胸主動脈的舒張作用，表明NO/NOS系統(tǒng)調(diào)節(jié)Apelin-13對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用。(3)細胞信號轉導通路鈣離子通道部份介導Apelin-13對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用。(4)Apelin-13對去內(nèi)皮的胸主動脈環(huán)的舒張作用降低，表明Apelin-13對去大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用依賴于內(nèi)皮的完整性。(5)對于取自2K