pH對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)血管張力的影響及機(jī)制.pdf

1、目的：觀察pH改變對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)靜息張力的影響，對(duì)去甲腎上腺素(norepinephrine，NE)、氯化鉀(potassiumchloride，KCl)、U46619預(yù)收縮血管環(huán)的影響，以及對(duì)硝普鈉(sodiumnitroprusside，SNP)、地西泮（diazepam，DZP）舒張作用的影響，并探討其作用機(jī)制。
　　 方法：采用離體血管張力實(shí)驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)分為三部分。
　　 1、第一部分，pH改變對(duì)大鼠離體胸

2、主動(dòng)脈環(huán)靜息張力的影響及機(jī)制。
　　 (1)觀察pH改變對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)靜息張力的影響；(2)探討靜息狀態(tài)下外鈣內(nèi)流和內(nèi)鈣釋放在pH=9.5收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)中的作用，以及孵育鈣通道阻斷劑維拉帕米(VEP,10-5mol/L)、Na+/Ca2+交換抑制劑KB-R7943(10-6mol/L)、Na+/H+交換抑制劑氨氯吡咪(AM，10-4mol/L)對(duì)pH=9.5收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的影響。
　　 2、第二部分

3、，pH改變對(duì)NE、KCl、U46619收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的影響及機(jī)制。(1)觀察pH改變對(duì)NE(10-6mol/L)、KCI(60mmol/L)、U46619(10-7mol/L)誘發(fā)的大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響；(2)探討去除內(nèi)皮后對(duì)此作用的影響，以及孵浴一氧化氮合酶(eNOS)抑制劑N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME，10-4mol/L)、環(huán)氧合酶抑制劑吲哚美辛(Indo，10-5mol/L)、鈣激活鉀通道(KCa)阻

4、滯劑四乙胺(TEA，10-2mol/L)、電壓依賴性鉀通道(Kv)阻滯劑4-氨基吡啶(4-AP，10-3mol/L)、ATP敏感性鉀通道(KATP)阻滯劑格列本脲（Gli，l0-5mol/L）和內(nèi)向整流鉀通道(Kir)阻滯劑氯化鋇(BaCl2，10-3mol/L)對(duì)此作用的影響。
　　 3、第三部分，觀察pH改變對(duì)SNP(10-9～10-5mol/L)、DZP(10-7～10-4mol/L)舒張大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的影響。

5、　　 結(jié)果：分三部分陳述。
　　 1、第一部分，pH改變對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)靜息張力的影響及機(jī)制。(1)胞外酸性環(huán)境下隨pH值逐漸降低，大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)靜息張力無(wú)顯著改變；堿性環(huán)境下隨pH值逐漸增加，其靜息張力顯著升高，其中pH=8.5、9.0、9.5、10.0時(shí)的Emax分別為（11.79±6.83）％、（30.25±3.57）%、（92.24±5.73）%、（110.85±7.78）%。(2)外鈣內(nèi)流和內(nèi)鈣釋放均參與pH

6、=9.5時(shí)的胸主動(dòng)脈環(huán)收縮，VEP可部分阻斷其收縮。KB-R7943和AM對(duì)pH=9.5時(shí)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)收縮有減弱作用（P＜O.O1），其Emax分別為（48.33±5.75）%、(32.12±4.45)%。
　　 2、第二部分，pH改變對(duì)NE、KCl、U46619預(yù)收縮血管環(huán)的影響及機(jī)制。
　　 (1)胞外酸性環(huán)境下，隨pH值逐漸降低，10-6mol/LNE收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)張力逐漸減弱。其中pH=7.0、6.

7、5、6.0、5.5、5.0時(shí)的Emax分別為(100.26±11.56)%、（76.07±9.54）%、(35.04±9.59)%、（21.52±13.86）%、（14.64±8.92）%。胞外堿性環(huán)境下，隨pH值逐漸增加，10-6mol/LNE收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)張力逐漸減弱；當(dāng)pH=1O.O時(shí)，血管失去活性。其中pH=8.0、8.5、9.0、9.5、10.0時(shí)的Emax分別為（107.27±15.68）%、（77.21±12.17

8、）%、（45.58±3.60）%、（27.52±18.88）%、（0.08±0.10）%。(2)胞外酸性環(huán)境下，隨pH值逐漸降低，60mmol/LKCl收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)張力呈先升后降的趨勢(shì)。其中pH=7.0、6.5、6.0、5.5、5.0、4.5時(shí)的Emax分別為（113.35±5.04）%、（106.55±5.71）%、（95.38±7.85）%、（66.84±11.86）%、（57.36±4.31）%、（17.33±1.51）

9、%。胞外堿性環(huán)境下，隨pH值逐漸增加，60mmol/LKCl收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)張力顯著升高：當(dāng)pH=1O.O時(shí)，血管失去活性。其中pH=8.0、8.5、9.0、9.5、10.0時(shí)的Emax分別為（111.73±8.27）%、（112.29±6.29)%、（110.44±5.89)%、（121.15±16.31)%，（3.79±4.40)%。(3)胞外酸性環(huán)境下，隨pH值逐漸降低，10-7mol/LU46619收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)張

10、力逐漸減弱。其中pH=7.0、6.5、6.0、5.5、5.0時(shí)的Emax分別為（95.44±3.77)%、（83.38±7.57)%、（65.88±9.54)%、（43.97±3.92)%、（22.48±2.25）%。胞外堿性環(huán)境下，隨pH值逐漸增大，l0-7mol/LU46619收縮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)張力逐漸減弱。其中pH=8.0、8.5、9.0、9.5、10.0時(shí)的Emax分別為（100.26±2.20）%、（88.44±1.86）

11、%、（71.30±5.34）%、（39.74±3.65）%、（18.53±2.17）%。(4)胞外酸中毒(pH=6.5)和堿中毒(pH=8.5)均能減弱10-6mol/LNE對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的收縮作用。在pH=6.5或pH=8.5的HEPES液中，加入相應(yīng)濃度的L-NAME、Indo、TEA、4-AP、Gli、BaC12，血管張力發(fā)生變化，當(dāng)血管張力再次達(dá)坪值后加入10-6mol/LNE，與對(duì)照組比較，TEA、BaCl2可抑制酸中毒

12、或堿中毒減弱NE誘導(dǎo)的縮血管作用（P＜0.01），L-NAME、Indo、4-AP、Gli則無(wú)此作用(P＞0.05)。
　　 3、第三部分，pH改變對(duì)SNP、DZP舒張大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的影響。(1)不同pH條件下，SNP(10-9～10-5mol/L)、DZP(10-7～10-4mol/L)對(duì)靜息狀態(tài)下的血管環(huán)無(wú)明顯舒張作用（P＞0.05）；與對(duì)照組(pH=7.4)比較，pH=6.5或pH=8.5對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的靜息張力

13、無(wú)顯著影響，其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。(2)不同pH條件下，SNP(10-9～10-5mol/L)、DZP(10-7～10-4mol/L)對(duì)NE、KCl、U46619預(yù)收縮的大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用不同，pH=6.5或pH=8.5能顯著增強(qiáng)SNP或DZP的舒張作用，與pH=7.4比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 結(jié)論：(1)胞外堿性環(huán)境下，大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)靜息張力隨pH值增大而顯著升高，此作用依賴外