miR-374b-5p對裸鼠人胃癌種植瘤的影響及其靶基因RECK的研究.pdf

1、目的:
　　通過裸鼠人胃癌種植瘤模型，探討miR-374b-5p及其靶基因RECK在胃癌生長、侵襲、轉移中的作用。
　　方法:
　　1.培養(yǎng)人胃癌細胞株MGC-803，使用BABL/c裸鼠建立人胃癌種植瘤動物模型。
　　2.隨機分為3組：空白對照組、陰性對照組(體內(nèi)轉染無義序列，NC-inhibitor)和miR-374b-5p抑制組(體內(nèi)轉染miR-374b-5p抑制劑，Hsa-micro-374b-5p in

2、hibitor)，觀察腫瘤生長情況，HE染色觀察種植瘤標本的病理學特征。
　　3.采用qRT-PCR檢測三組裸鼠體內(nèi)轉染后人胃癌種植瘤組織的miR-374b-5p表達水平；熒光素酶活性檢測驗證miR-374b-5p是否通過靶向作用RECK對其表達進行調控；qRT-PCR、免疫組織化學分別檢測三組裸鼠人胃癌種植瘤RECK的mRNA轉錄水平和蛋白表達情況。
　　結果:
　　1. miR-374b-5p抑制組種植瘤生長較空白

3、對照組和陰性對照組種植瘤生長緩慢。
　　2. miR-374b-5p抑制組的病理學檢測提示種植瘤的惡性程度較空白對照組和陰性對照組下降。
　　3. miR-374b-5p抑制組種植瘤的miR-374b-5p表達水平較空白對照組和陰性對照組明顯降低。
　　4.熒光素報告載體系統(tǒng)證實RECK是miR-374b-5p直接調控的靶基因。
　　5. miR-374b-5p抑制組種植瘤的RECK轉錄水平及蛋白表達水平較空白對