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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究鞘氨醇激酶-1(Sphingosine kinase-1,SphK1)在人胃癌裸鼠移植瘤生長中的作用,并探討其機(jī)制。
方法:將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期的SGC7901(人胃癌)細(xì)胞注射于裸鼠皮下,建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,建模成功后將裸鼠隨機(jī)分為4組,每組8只,分別用生理鹽水、鞘氨醇激酶抑制劑-Ⅱ(Sphingosine kinase inhibitorⅡ,SKI-Ⅱ)、順鉑、SKI-Ⅱ聯(lián)合順鉑進(jìn)行治療,每周注射1次,共3次
2、。定期測(cè)量腫瘤體積,繪制腫瘤時(shí)間-體積生長抑制曲線,在治療結(jié)束后的第7天脫頸處死全部裸鼠,取下瘤體組織,免疫組化法及Western blot法檢測(cè)瘤體內(nèi)SphK1、Bax、Bcl-2蛋白的表達(dá)情況,TUNEL法檢測(cè)腫瘤組織細(xì)胞凋亡。
結(jié)果:
1.成功構(gòu)建了人胃癌裸鼠移植瘤模型。
2.腫瘤時(shí)間-體積生長抑制曲線結(jié)果顯示移植瘤生長速度由快到慢依次為:對(duì)照組>SKI-Ⅱ組>順鉑組>聯(lián)合用藥組。
3.免疫
3、組化及Western blot結(jié)果顯示:SKI-Ⅱ單獨(dú)及聯(lián)合順鉑應(yīng)用于荷瘤裸鼠后,均能通過抑制SphK1蛋白的表達(dá)增加Bax/Bcl-2的比值,且聯(lián)合用藥組能較SKI-Ⅱ組和順鉑組更顯著地減少腫瘤組織SphK1、Bcl-2蛋白的表達(dá)(P<0.05),并增加Bax蛋白的表達(dá)(P<0.05)。
4.TUNEL結(jié)果顯示:SKI-Ⅱ組、順鉑組、聯(lián)合用藥組的凋亡率均大于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),聯(lián)合用藥組的凋亡率大于SK
4、I-Ⅱ組及順鉑組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
5.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,SKI-Ⅱ組裸鼠的體質(zhì)量高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);順鉑組的體質(zhì)量低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);聯(lián)合用藥組的體質(zhì)量與對(duì)照組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.405)。
結(jié)論:
1.SphK1對(duì)胃癌的生長有一定影響。
2.SphK1通過調(diào)節(jié)Bax/Bcl-2的比值起到影響胃癌生長的作用,胃癌細(xì)胞中S
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