慢病毒介導的ATF5基因沉默及其對荷人卵巢癌裸鼠移植瘤增殖的影響.pdf

1、目的:
　　將慢病毒介導的ATF5-siRNA注射入人卵巢癌裸鼠移植瘤內，觀察慢病毒介導的人轉錄激活因子5(ATF5)基因沉默效果，及其對荷人卵巢癌裸鼠移植瘤增殖及凋亡的影響。
　　方法:
　　1.取對數生長期的SKOV-3細胞，并且皮下注射于裸鼠右側腋窩，建立荷人卵巢癌裸鼠移植瘤模型。接種人卵巢癌細胞7天后，將30只裸鼠隨機分為3組，分別為:(1)空白對照組:瘤內注射PBS100μl/（只·次）;(2)陰性對照組:瘤

2、內注射空載慢病毒100μ l/（只·次）;(3)實驗組:瘤內注射ATF5-siRNA慢病毒100μ l/（只·次）。觀察裸鼠的一般情況，包括飲食、睡眠、活動、精神狀態(tài)等，定期測量移植瘤的長徑及短徑，計算移植瘤的體積，并繪制移植瘤生長曲線，4周后處死裸鼠，取出腫瘤組織并稱重移植瘤的重量，計算抑瘤率。
　　2.采用RT-PCR及Western-blot的方法檢測各組腫瘤組織中ATF5mRNA及蛋白的表達情況，采用TUNEL法檢測移植瘤

3、組織的凋亡情況。
　　結果:
　　1.實驗組中移植瘤的生長速度明顯落后于陰性對照組及空白對照組，實驗組中移植瘤的重量及體積均明顯低于空白對照組及陰性對照組(P＜0.01)。實驗組抑瘤率49.60％。
　　2.實驗組與空白對照組及陰性對照組相比，ATF5mRNA及蛋白的表達水平均明顯下降(P＜0.01)，提示慢病毒介導的ATF5基因沉默可以顯著干擾ATF5基因的表達。
　　3.TUNEL結果顯示，ATF5基因沉默后

4、能顯著引起移植瘤組織的凋亡:ATF5-siRNA慢病毒實驗組凋亡指數為(34.63±1.91)％，空白對照組為(5.07±0.20)％，陰性載體組為(6.04±0.19)％，實驗組的凋亡率明顯增高，且差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　結論:
　　將攜帶ATF5-RNAi的慢病毒注射入SKOV3裸鼠移植瘤內，可使移植瘤組織內ATF5的表達明顯沉默，并能夠有效地抑制裸鼠移植瘤的增殖，促進移植瘤組織的凋亡。RNA干擾抑制A