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文檔簡介
1、研究背景:
耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)仍然是臨床上感染性疾病致病率和病死率較高的主要原因,以萬古霉素為代表的糖肽類抗生素是各種指南所推薦的治療這類細(xì)菌感染的最有效藥物之一。近年來臨床萬古霉素治療失敗的病例逐年增多,在世界范圍內(nèi),引起了對萬古霉素為代表的糖肽類抗生素耐藥問題的關(guān)注。為此,2006年CLSI(the clinica
2、land laboratory standards institute,原NCCLS)修正了金葡菌對萬古霉素的敏感性和抗性臨界值,即萬古霉素敏感菌的MIC由原來的4μg/ml改為2μg/ml,萬古霉素中介菌的MIC由先前的8~16μg/ml改為4~8μg/ml。根據(jù)這一新的規(guī)定,可以將MRSA對萬古霉素的耐藥程度分為兩個(gè)水平:一種為高水平耐藥的VRSA(vancomycin-resistant staphylococcus aureus
3、),其萬古霉素MIC≥16μg/ml;另一種則為低水平耐藥的hVISA(heterogeneous vancomycin intermediate resistant staphylococcus aureus)和VISA( vancomycin intermediate resistant staphyl-ococcusareus),其中VISA的MIC介于4~8μg/ml,而hVISA的情況較為特殊,目前報(bào)告多數(shù)hVISA的萬古霉素
4、MIC介于1~4μg/ml,但是它們可以在含有萬古霉素的平皿上以10-6的頻率產(chǎn)生萬古霉素MIC水平在中介范圍的亞克隆(subclone),這也是將之定義為“異質(zhì)性”的由來。事實(shí)表明,對萬古霉素異質(zhì)性耐藥的金葡菌(hVISA)遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于耐藥/中介的金葡菌(VRSA/VISA),因此近年來hVISA的研究成為醫(yī)學(xué)上的熱點(diǎn)。迄今為止,濟(jì)南地區(qū)的異質(zhì)性萬古霉素中介會(huì)葡菌(hVISA)的分離率尚無報(bào)道;在新標(biāo)準(zhǔn)下,尚無一種簡單易行且具有高度敏感性
5、和特異性的方法以供臨床常規(guī)進(jìn)行hVISA的篩選。
研究目的:
(1)了解濟(jì)南地區(qū)臨床分離的MRSA標(biāo)本中異質(zhì)性萬古霉素中介金葡菌(hVISA)的分離率。
(2)對2ug/ml萬古霉素(BHIV2)、4ug/ml萬古霉素(BHIV4)及5ug/ml替考拉寧(BHIT5)腦心浸液瓊脂篩選法初篩的三種篩選方法進(jìn)行評價(jià)。
研究對象與方法:
(1)對收集于濟(jì)南地區(qū)6家三甲醫(yī)院的
6、216株臨床分離的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)分別進(jìn)行2ug/ml萬古霉素(BHIV2)、4ug/ml萬古霉素(BHIV4)及5ug/ml替考拉寧(BHIT5)腦心浸液瓊脂篩選法初篩。
(2)對瓊脂篩選法初篩的陽性菌株進(jìn)行macroEtest(MET)法進(jìn)一步篩選。
(3)對macroEtest(MET)法篩選的陽性菌株用改良菌群分析策略-曲線下面積法(PAP-AUC)進(jìn)行確認(rèn)。
結(jié)果:
7、 (1)BHIV2、BHIV4、BHIT5篩選法初篩的菌株數(shù)分別為:143株、19株、110株。
(2)初篩的陽性菌株經(jīng)macroEtest(MET)法進(jìn)一步篩選陽性菌株分別為:32株、16株、29株。
(3)macroEtest(MET)法篩選的陽性菌株,經(jīng)改良菌群分析策略-曲線下面積法(PAP-AUC)最終確認(rèn)菌株分別為:23株、14株、21株。
(4)三種方法篩選的陽性菌株,減去重復(fù)
8、菌株,最終確認(rèn)為hVISA的為29株;則濟(jì)南地區(qū)hVISA的分離率至少為13.4%(29/216)。結(jié)論:
(1)通過三種篩選方法,hVISA在本地區(qū)臨床分離的MRSA菌株都有一定的分離率,這可能是臨床萬古霉素治療失敗的原因之一。
(2)三種方法中BHIV2、BHIT5篩選法敏感性無差異,均高于BHIV4篩選法;BHIV2、BHIT5篩選法特異性亦無差異,BHIV4篩選法特異性高于BHIV2、BHIT5篩選法
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