濟南地區(qū)異質性萬古霉素中介金葡菌的分離率及方法研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景:
   耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)仍然是臨床上感染性疾病致病率和病死率較高的主要原因,以萬古霉素為代表的糖肽類抗生素是各種指南所推薦的治療這類細菌感染的最有效藥物之一。近年來臨床萬古霉素治療失敗的病例逐年增多,在世界范圍內,引起了對萬古霉素為代表的糖肽類抗生素耐藥問題的關注。為此,2006年CLSI(the clinica

2、land laboratory standards institute,原NCCLS)修正了金葡菌對萬古霉素的敏感性和抗性臨界值,即萬古霉素敏感菌的MIC由原來的4μg/ml改為2μg/ml,萬古霉素中介菌的MIC由先前的8~16μg/ml改為4~8μg/ml。根據這一新的規(guī)定,可以將MRSA對萬古霉素的耐藥程度分為兩個水平:一種為高水平耐藥的VRSA(vancomycin-resistant staphylococcus aureus

3、),其萬古霉素MIC≥16μg/ml;另一種則為低水平耐藥的hVISA(heterogeneous vancomycin intermediate resistant staphylococcus aureus)和VISA( vancomycin intermediate resistant staphyl-ococcusareus),其中VISA的MIC介于4~8μg/ml,而hVISA的情況較為特殊,目前報告多數hVISA的萬古霉素

4、MIC介于1~4μg/ml,但是它們可以在含有萬古霉素的平皿上以10-6的頻率產生萬古霉素MIC水平在中介范圍的亞克隆(subclone),這也是將之定義為“異質性”的由來。事實表明,對萬古霉素異質性耐藥的金葡菌(hVISA)遠遠多于耐藥/中介的金葡菌(VRSA/VISA),因此近年來hVISA的研究成為醫(yī)學上的熱點。迄今為止,濟南地區(qū)的異質性萬古霉素中介會葡菌(hVISA)的分離率尚無報道;在新標準下,尚無一種簡單易行且具有高度敏感性

5、和特異性的方法以供臨床常規(guī)進行hVISA的篩選。
   研究目的:
   (1)了解濟南地區(qū)臨床分離的MRSA標本中異質性萬古霉素中介金葡菌(hVISA)的分離率。
   (2)對2ug/ml萬古霉素(BHIV2)、4ug/ml萬古霉素(BHIV4)及5ug/ml替考拉寧(BHIT5)腦心浸液瓊脂篩選法初篩的三種篩選方法進行評價。
   研究對象與方法:
   (1)對收集于濟南地區(qū)6家三甲醫(yī)院的

6、216株臨床分離的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)分別進行2ug/ml萬古霉素(BHIV2)、4ug/ml萬古霉素(BHIV4)及5ug/ml替考拉寧(BHIT5)腦心浸液瓊脂篩選法初篩。
   (2)對瓊脂篩選法初篩的陽性菌株進行macroEtest(MET)法進一步篩選。
   (3)對macroEtest(MET)法篩選的陽性菌株用改良菌群分析策略-曲線下面積法(PAP-AUC)進行確認。
   結果:

7、   (1)BHIV2、BHIV4、BHIT5篩選法初篩的菌株數分別為:143株、19株、110株。
   (2)初篩的陽性菌株經macroEtest(MET)法進一步篩選陽性菌株分別為:32株、16株、29株。
   (3)macroEtest(MET)法篩選的陽性菌株,經改良菌群分析策略-曲線下面積法(PAP-AUC)最終確認菌株分別為:23株、14株、21株。
   (4)三種方法篩選的陽性菌株,減去重復

8、菌株,最終確認為hVISA的為29株;則濟南地區(qū)hVISA的分離率至少為13.4%(29/216)。結論:
   (1)通過三種篩選方法,hVISA在本地區(qū)臨床分離的MRSA菌株都有一定的分離率,這可能是臨床萬古霉素治療失敗的原因之一。
   (2)三種方法中BHIV2、BHIT5篩選法敏感性無差異,均高于BHIV4篩選法;BHIV2、BHIT5篩選法特異性亦無差異,BHIV4篩選法特異性高于BHIV2、BHIT5篩選法

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