昆布提取物J201對肺間質(zhì)纖維化的作用及其機(jī)制初步研究.pdf

1、J201是青島大學(xué)附屬醫(yī)院提供的昆布提取物.前期實驗研究表明,J201在體外能夠明顯抑制人胚肺成纖維細(xì)胞的增殖,將其抑制在G<,0>/G<,1>期,并且能夠抑制其蛋白質(zhì)的合成,從而起到抗肺纖維化的作用.該文通過體外和體內(nèi)的實驗,進(jìn)一步確證了J201的抗肺纖維化作用并且探討了其作用的機(jī)理.肺纖維化是由于過多的成纖維細(xì)胞聚集和細(xì)胞外基質(zhì)成分如膠原蛋白過度沉積而導(dǎo)致的正常肺組織結(jié)構(gòu)改變和功能喪失的一類疾病.目前,體外評價藥物抗肺纖維化的細(xì)胞模

2、型還不是很成熟,因此該文分別采用了與肺纖維化密切相關(guān)的PDGF-BB、大鼠肺泡巨噬細(xì)胞(Alveolar Macrophage,AM)條件培養(yǎng)上清液作為誘導(dǎo)因子,在體外建立了評價藥物抗肺纖維化的細(xì)胞模型.成纖維細(xì)胞的增殖采用了MTT法檢測,膠原的含量采用了Sircol膠原檢測試劑盒進(jìn)行檢測.為了進(jìn)一步探討機(jī)理,我們提取了J201的主要成分,并制備了J201主要成分的生物傳感芯片(SPR),利用生物傳感器研究了J201與PDGF-BB的相

3、互作用.結(jié)果發(fā)現(xiàn),J201的主要成分與PDGF-BB有較強(qiáng)的結(jié)合.推測J201的抗纖維化的作用可能與拮抗PDGF-BB有關(guān).體內(nèi)采用了氣管內(nèi)注射博來霉素導(dǎo)致的大鼠肺纖維化模型,評價了J201的抗肺纖維化作用.不同濃度J201通過灌胃每天給藥,28天后經(jīng)腹主動脈取血,分離血清,-20℃儲存?zhèn)溆?檢測血清中IL-4、IFN-γ的含量.取出肺臟,稱重后,計算肺系數(shù),切下右肺,勻漿測定了肺組織的丙二醛、羥脯氨酸含量,左肺投入4﹪的多聚甲醛中固定

4、,常規(guī)切片,HE染色,觀察肺組織病理形態(tài)學(xué)變化.結(jié)果顯示光鏡下J201能夠減輕肺炎癥細(xì)胞浸潤及纖維化的程度,肺指數(shù)降低,治療組較對照組肺組織上清液丙二醛、羥脯氨酸的含量均有明顯的降低,并且血清IL-4的含量降低,IFN-γ升高.我們還觀察了J201對肺纖維化大鼠肺泡巨噬細(xì)胞釋放TNF-α的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其對肺纖維化大鼠肺泡巨噬細(xì)胞釋放TNF-α有一定的抑制作用.綜合體內(nèi)和體外的實驗結(jié)果,我們得出結(jié)論:J201能夠通過抑制PDGF-BB誘