人腸系膜動脈平滑肌BK-,Ca-及血管內(nèi)皮功能的增齡變化的研究.pdf

1、目的：隨著年齡增長血管將發(fā)生老化，對血管老化的研究主要包括對內(nèi)皮、平滑肌和細胞外基質(zhì)三方面的研究。內(nèi)皮細胞通過其分泌的內(nèi)皮源性血管舒張因子和內(nèi)皮源性血管收縮因子調(diào)節(jié)血管舒縮功能，而平滑肌上的大電導鈣激活鉀通道 (BKCa) 通過膜電位調(diào)節(jié)血管張力。本研究旨在探討內(nèi)皮功能和血管平滑肌BKCa電生理特性的增齡變化情況。方法：選擇行腹部手術(shù)且無血管病變的病人24例，按年齡分為三組：青年組20～40歲、中年組40～60歲和老年組60歲以上，取其

2、腸系膜動脈，采用木瓜蛋白酶、膠原酶兩步消化分離方法獲得單個平滑肌細胞，應用單通道膜片鉗技術(shù)，在細胞貼附式和內(nèi)面向外式模式下，觀察BKCa的電生理特性，檢測其開放概率、電流幅值、平均開放時間和平均關(guān)閉時間。并改變浴液中Ca2+濃度，觀察上述指標變化情況，分析電生理特性的增齡變化。同時檢測其血漿NO和ET濃度，觀察內(nèi)皮功能隨衰老變化情況。結(jié)果：⑴在細胞貼附式膜片,浴液和電極液均為高鉀溶液(140mmol/L),通道電流幅值和開放概率隨去極化

3、電壓增大而增加,單通道電導值為150.5±27.9 pS,n=24。膜電位為20、40和60mV時比較三組的開放概率，老年組較另外兩組低(P﹤0.05)。三組的電導值無顯著性差異。⑵在內(nèi)面向外式膜片,對稱性高鉀溶液中,開放概率隨浴液Ca2+濃度增加而增加，單通道電導值214.3±22.2,n=24，比細胞貼附式電導值大(P﹤0.01)。浴液中無鈣或鈣離子濃度很低時，三組之間的開放概率、平均開放時間和平均關(guān)閉時間無顯著性差異。當浴液中Ca

4、2+濃度增加至5×10-7、10-6mol/L時，老年組的開放概率顯著低于另外兩組(P﹤0.05)，而平均關(guān)閉時間顯著高于另外兩組(P﹤0.05)。⑶老年組血漿NO濃度（75.12±15.31μmol/L，n=8）比青年組和中年組低(95.54±19.57,n=8和91.85±11.17μmol/L,n=8, P﹤0.05)，血漿ET濃度(77.82±20.42 ng/L,n=8)明顯高于另外兩組(分別為 52.56±14.61 ng/