酪氨酸血癥Ⅰ型的臨床及基因突變分析.pdf

1、目的:分析3例酪氨酸血癥Ⅰ型患兒的臨床及致病基因突變。
　　方法:按照國際罕見病組織提出的酪氨酸血癥Ⅰ型診斷標(biāo)準(zhǔn)回顧性的收集了3例患兒臨床資料，采用PCR直接測序技術(shù)對(duì)FAH基因的14個(gè)外顯子及鄰近100bp的片段進(jìn)行測序，運(yùn)用BioEdit軟件讀取測序圖并人工核對(duì);運(yùn)用NCBI Blast工具與NCBI提供的基因組序列比對(duì)，搜索千人基因組或dbSNP137數(shù)據(jù)庫，除外已知的SNP位點(diǎn)。發(fā)現(xiàn)突變后在父母中進(jìn)行突變的驗(yàn)證，Clust

2、al X軟件分析物種間FAH酶的同源性。Polyphen軟件通過計(jì)算特定位置獨(dú)立計(jì)數(shù)得分(PSIC)預(yù)測錯(cuò)義突變的意義，PSIC≤0.5時(shí)為非致病突變;0.5＜PSIC≤1.5，根據(jù)氨基酸改變位點(diǎn)性質(zhì)及改變后氨基酸類型的不同而判斷;1.5＜PSIC≤2，有可能為致病突變;PSIC＞2，為致病突變。
　　結(jié)果:例1，男，5個(gè)月21天，遷延性腹瀉，肝脾腫大、移動(dòng)性濁音，甲胎蛋白＞1210μg/L，血酪氨酸110.8μmol/L，尿琥珀

3、酰丙酮83.7μmol/L，同胞中姐姐因慢性腹瀉就診，疑診為酪氨酸血癥Ⅰ型。第5外顯子的455位堿基鳥嘌呤G變?yōu)橄汆堰蔄(c.455 G＞A)，導(dǎo)致在152位形成終止密碼子(W152X)，第12外顯子1027位堿基鳥嘌呤G變?yōu)橄汆堰蔄(c.1027 G＞A)，導(dǎo)致第343位氨基酸由甘氨酸變?yōu)榫彼?W343 R)，c.455 G＞A來源于父親，c.1027 G＞A來源于母親，即c.455 G＞A/c.1027 G＞A復(fù)合雜合突變。例2，

4、女，6歲1個(gè)月，晚發(fā)型佝僂病起病，身高及體重在同齡兒第3百分位以下，肝脾腫大，串珠肋、手足鐲、雙膝向右彎曲，血磷0.54 mmol/L，血鈣2.41 mmol/L，堿性磷酸酶1620IU/L，甲胎蛋白412.8μg/L，血酪氨酸835.8μmol/L，尿琥珀酰丙酮27.48μmol/L，鈣劑及維生素D3治療無效?；純和庾娓改笧榻H婚配。在第12外顯子存在c.1027G＞A純合突變，父母均為c.1027 G＞A雜合突變攜帶者。Clusta

5、l X預(yù)測c.1027G＞A突變?yōu)楦叨缺Ｊ匦酝蛔儯?Polyphen軟件計(jì)算突變的PSIC得分為3.235，為致病突變。例3，男，2歲4月，因間斷性發(fā)熱伴吐瀉而發(fā)現(xiàn)肝臟腫大就診，血磷0.51 mmol/L，堿性磷酸酶628 IU/L，甲胎蛋白1136μg/L，血酪氨酸543.26μmol/L，尿琥珀酰丙酮32.35μmol/L，反復(fù)擴(kuò)增外顯子1均未成功。
　　結(jié)論:酪氨酸血癥Ⅰ型忠兒可以以遷延性腹瀉或晚發(fā)型佝僂病起病，有肝臟腫大，