人血漿HDL作為抗腫瘤藥物載體的研究.pdf

1、本課題是利用天然磷脂和HDL脫脂后載脂蛋白及抗腫瘤藥物人工重組成HDL-藥物復(fù)合物，以肝癌細(xì)胞SMMC-7721作為模型細(xì)胞，肝L02細(xì)胞作為正常對(duì)照細(xì)胞研究對(duì)肝癌細(xì)胞的選擇性作用及動(dòng)物體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)和組織分布。用大豆卵磷脂，脫脂載脂蛋白和阿克拉霉素(ACM)通過超聲方法重組形成HDL-ACM復(fù)合物(rHDL-ACM)，經(jīng)過SephadexG-25分離純化。通過瓊脂糖電泳，超離心法，電鏡測(cè)定其遷移率，密度，包封率和粒徑及形態(tài)。用肝癌細(xì)胞

2、SMMC-7721和正常肝細(xì)胞L02作為模型，用天然HDL競(jìng)爭(zhēng)性細(xì)胞結(jié)合研究其對(duì)細(xì)胞的結(jié)合特性，用MTT法比較rHDL-ACM與游離ACM(fACM)對(duì)SMMC-7721細(xì)胞的毒性作用，rHDL-ACM對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和L02細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，及其對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721的選擇性。靜脈注射rHDL-ACM和fACM，通過加入熒光增強(qiáng)劑ALCl3用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)法研究大鼠體內(nèi)血藥動(dòng)力學(xué)和組織分布，建立HPLC測(cè)定小鼠體內(nèi)

3、血藥動(dòng)力學(xué)方法。研究rHDL-ACM在體外4℃，pH8.0，10mMTris緩沖液；pH7.0，10mM磷酸緩沖液和pH6.5；10mM磷酸緩沖液中穩(wěn)定性。在-70℃下，pH7.0，10mM磷酸緩沖液；pH6.5，10mM磷酸緩沖液中穩(wěn)定性。及凍干復(fù)溶對(duì)rHDL-ACM穩(wěn)定性的影響。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示rHDL-ACM的遷移率(0.34)比天然HDL(0.16)稍快一些。包封率為92％，純度大于90％。超離心后rHDL-ACM密度在1.063